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上海撫生實業(yè)有限公司
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更新時間:2018-04-16 11:06:09瀏覽次數(shù):427次
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人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞;MEG-01價格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞;MEG-01價格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞;MEG-01價格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 MEG-01細(xì)胞株源自一位CML患者成巨核細(xì)胞轉(zhuǎn)換期的骨髓細(xì)胞。 細(xì)胞質(zhì)因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa,高碘酸-Schiff(PAS)反應(yīng),α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶陽性。 髓過氧化物酶,α丁酸萘酯酶,氯化醋酸AS-D萘*酯酶和堿性磷酸酶陰性。 用單克隆抗體BA-1(抗B細(xì)胞,粒性白細(xì)胞),HPL-3(抗球蛋白IIb/IIIa)和20.3(抗單核細(xì)胞,血小板)染色成陽性。 其他淋巴和骨髓類抗體成陰性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 1:
2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
規(guī)格:96T/48T兔子皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒英文名稱:rabbit Corticosterone,CORT ELISA Kit進(jìn)口/原裝
規(guī)格:96T/48T兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒英文名稱:Rabbit Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
規(guī)格:96T/48T兔子前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒英文名稱:rabbit Prostaglandin E1,PGE1 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
規(guī)格:96T/48T兔子前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒英文名稱:rabbit Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA Kit*
規(guī)格:96T/48T兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒英文名稱:Rabbit glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit *
規(guī)格:96T/48T兔子神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒英文名稱:rabbit Nerve growth factor,NGF ELISA Kit進(jìn)口/原裝
Anti-SSTR2 /FITC 熒光素標(biāo)記*受體2(SSTR2)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MMP-1(matrix metalloproteinases-1) 基質(zhì)金屬蛋白酶-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
色素上皮源性因子抗體 Anti-PEDF 0.1ml
4EBP2 英文名稱: eIF4E結(jié)合蛋白2抗體 0.1ml
Estrogen Receptor alpha 英文名稱: 雌激素受體α抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Myt1(Ser83) 磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體 規(guī)格 0.1ml
MMP-1(matrix metalloproteinases-1) 基質(zhì)金屬蛋白酶-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
NR2A (Glutamate receptor2A) *受體(N端抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD44/PGP1 CD44抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh p58ipk p58ipk抗體 規(guī)格 0.1ml
CALML5 Kit Human 人 CALML5 ELISA配對抗體 ELISA
TSPAN13 英文名稱: 四分子交聯(lián)體13抗體(四旋蛋白) 0.2ml
C4orf33 英文名稱: 4號染色體開放閱讀框33抗體 0.2ml
Anti-CD44/PGP1 CD44抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-VPS18/FITC 熒光素標(biāo)記空泡分選蛋白18抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CK16(Cytokeratin 16) 細(xì)胞角蛋白16抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
周期素依賴性激酶3抗體 Anti-CDK3 0.1ml
SHANK2 英文名稱: 富含脯酸突觸相關(guān)蛋白SHANK2抗體 0.2ml
EPS15R 英文名稱: 表皮生長因子受體底物15抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GAB2 (Tyr452) 磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體 規(guī)格 0.1ml
CK16(Cytokeratin 16) 細(xì)胞角蛋白16抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
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