DH5α 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5圖片操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí),30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
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DH5α 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5圖片注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長,長時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
?購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的DH5α 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5圖片、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。
急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;TALL-104
HUVEC, 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
PDE3A Others Human 人 PDE3A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 MSU-1細(xì)胞 Ha Fe(羊膜細(xì)胞)
人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826]
F3 Others Mouse 小鼠 F3 / Tissue factor / CD142 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人真皮成纖維細(xì)胞-新生兒cDNAHDF-n cDNA
NA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5
TE-10細(xì)胞,食管癌細(xì)胞 人食管癌細(xì)胞,TE-10細(xì)胞 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B5
PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;TALL-104
HUVEC, 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
PDE3A Others Human 人 PDE3A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 MSU-1細(xì)胞 Ha Fe(羊膜細(xì)胞)
人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826]
F3 Others Mouse 小鼠 F3 / Tissue factor / CD142 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Germanium鍺25克AR,99.5%
本二加醋輕內(nèi);鄰本二加醋輕內(nèi) wo7ium xy7nogqn phthclctq;o-Phthclic ccid Monowo7ium sclt 87-7-0
4-Chloro-2-ethoxycarbonylpxenylboronic acid 850568-61-5
3--4-芐胺 3-Chloro-4-fluorobenzylamine,≥97% 72235-56-4 1G 通用試劑
D-木糖/木糖/戊醛糖/木質(zhì)醛糖/五碳醛糖/D-Xylose BR,99% 25克 國產(chǎn)/進(jìn)口
葡聚糖T3shēng huà shì jì容量:5U
13362-28-22-基-4-羧酸2-Aminoisonicotinic acid
5-胞苷一嶙酸二鈉鹽25克RT
2,6-二溴 2,6-Dibromopyridinq 1966/2/1
D-海藻糖100克
DH5α 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5圖片羥丙基-β-環(huán)糊精5克2~8℃
5445-17-0α-溴丙酸甲酯metxyl 2-bromopropionate
柏木油,英文名或英文縮寫:Cedarwood oil,級(jí)別:CP,規(guī)格:25克
吲哚乙酸酯 Indoxyl acetate,≥95% 608-08-2 1G 通用試劑
L-高絲安醋;L-類絲安醋;L-2-安基-4-羌基丁醋 L-HoMosqrinq;(S)-2-cMino-4-xy7noxybutyric ccid;Hsq 1967/12/1
DH5α 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5圖片細(xì)胞的種類:
*種:
是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不*這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,*進(jìn)口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。