| 上海懋康生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 硫酸諾爾斯菌素,D-熒光素,雷帕霉素 |
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主營產(chǎn)品： 硫酸諾爾斯菌素,D-熒光素,雷帕霉素 |
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| 參考價 | ￥ 998 |
| 訂貨量 | 1 件 |
更新時間：2024-04-10 11:13:12瀏覽次數(shù)：1007
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Luc 報告基因底物/ D-Luciferin D-螢火蟲熒光素鉀鹽
活體成像研究/體外生物發(fā)光研究/轉(zhuǎn)錄水平研究
搜索關(guān)鍵詞：
Luc reporter gene 報告基因；In vivo imaging 活體成像研究；轉(zhuǎn)錄水平研究；熒光素酶/ATP水平研究；報告基因質(zhì)粒；報告基yin病毒顆粒；螢火蟲熒光素；甲蟲熒光素；CAS：115144-35-9；
基本描述：
D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是體內(nèi)活體成像技術(shù)。作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下，D-熒光素（底物）被氧化發(fā)光。當(dāng)熒光素過量時，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性（見下圖）。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染進入細(xì)胞后，導(dǎo)入研究動物如大小鼠體內(nèi)，之后注入熒光素，通過生物發(fā)光成像技術(shù)（BLI）來檢測光強度變化，從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對此反應(yīng)體系的影響，根據(jù)生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。
基本應(yīng)用：
D-熒光素也常用于體外研究，包括熒光素酶和ATP水平分析；報告基因分析；高通量測序和各種污染檢測。
常見商業(yè)化類型的差異（熒光素鉀，鈉，游離酸）：
目前市場上有三種產(chǎn)品形式，D-熒光素（游離酸），D-熒光素（鈉鹽），和D-熒光素（鉀鹽）。這三種產(chǎn)品主要差別在于溶解特性。
1）D-熒光素（游離酸）在水以及緩沖體系內(nèi)的溶解性都很弱，除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）。
2）D-熒光素（鈉鹽）和D-熒光素（鉀鹽）能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中，使用方便，溶劑無毒性，特別適合體內(nèi)實驗。配成溶液后的三種產(chǎn)品，在絕大多數(shù)應(yīng)用上都沒有實質(zhì)性的差別。
3）D-熒光素（鈉鹽）和D-熒光素（鉀鹽）基本上沒有差別，主要是使用習(xí)慣等因素影響。整體來看，鉀鹽的應(yīng)用文獻明顯多于鈉鹽。
D-熒光素鉀鹽基本特性：
1）CAS 15144-35-9
2）化學(xué)名：4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt,D-Luciferin firefly, potassium salt
3）分子式：C11H7N2O3S2K
4）分子量：318.42 g/mol
5）純度：＞99% (HPLC)，分子生物學(xué)級（超純）
6）外觀：淺黃色至黃色粉末
7）溶解性：溶于水（60 mg/ml）
使用方法：
A．體外生物發(fā)光檢測
1）儲存液制備
用蒸餾水溶解D-熒光素（鉀鹽），配制成15mg/ml的儲存液（100×），混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存，避免反復(fù)凍融。建議使用的工作液濃度為150µg/ml（相當(dāng)于468µM）。
2）熒光素酶反應(yīng)緩沖液制備
配方【1×，參考Yuichi Oba, et al., 2003】：100mM Tris-HCl（pH 7.8），5mM MgCl2，250µM CoA，150µM ATP。具體緩沖液組成可參考其他文獻資料來調(diào)整。按照以上配方制備熒光素酶反應(yīng)緩沖液（2×）。
3）收集細(xì)胞裂解上清（熒光素酶表達）
根據(jù)需要檢測的細(xì)胞類型，選擇合適的裂解液進行細(xì)胞裂解，離心收集上清后續(xù)檢測待用。
4）螢火蟲熒光信號檢測
【注①】：螢火蟲熒光信號的檢測方法大體上取決于冷光測定儀（luminometer）類型（是手動型熒光計、單管注射型或者酶標(biāo)板讀數(shù)型熒光計）。根據(jù)特定發(fā)光測定儀，來考慮注射用量和程序設(shè)置。
【注②】：需設(shè)置不含熒光素酶的孔（用作陰性對照），以測定背景熒光。
例：注射式冷光測定儀（injectible luminometer，單樣或微孔板，200µl終體積）
a）吸取100µl熒光素酶反應(yīng)緩沖液（2×）到一干凈的冷光測定儀比色皿或96孔板的各孔（使用全白平底的96孔板）；
b）吸取50~98µl裂解上清到皿或孔內(nèi)；
c） 如果有需要，用水來補足使得總體積到198µl；
d）設(shè)置程序注射2µl熒光素儲存液（使工作濃度150µg/ml），程序：2~5秒延遲（delay），之后10s測定。
B．活體成像分析
1）用無菌的PBS（w/o Mg2+）或者DPBS（w/o Mg2+）配制D-熒光素（鉀鹽）工作液（15mg/ml），0.2µm濾膜過濾除菌?；靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b于-20℃或-80℃凍存，避免反復(fù)凍融。一旦使用，放到4℃解凍，保持冰冷且避光。
2）注射量取決于注射方式，具體如下：
注射方式 | 劑量 |
靜脈注射（25-27 gauge針頭） | 按10µl/g體重濃度，加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液 |
腹腔注射（25-27 gauge針頭） | 按10µl/g體重濃度，加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液 |
肌肉注射（27 gauge針頭） | 50µl，濃度為1-2mg/ml熒光素工作液 |
鼻內(nèi)注射（pipette） | 50µl，濃度為3mg/ml熒光素工作液 |
3）注射入體內(nèi)10-20 min（待光信號達到zui強穩(wěn)定平臺期），再進行成像分析。
注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線，從而確定zui高信號檢測時間和信號平臺期。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格（元） | 貨期 |
MX4603-100MG | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素（鉀鹽） | 100mg | 998 | 現(xiàn)貨 |
MX4603-500MG | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素（鉀鹽） | 500mg | 2500 | 現(xiàn)貨 |
MX4603-1G | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素（鉀鹽） | 1g | 4500 | 現(xiàn)貨 |
MX4603-5G | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素（鉀鹽） | 5×1g | 20200 | 現(xiàn)貨 |
MX4603-10G | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素（鉀鹽） | 10×1g | 36400 | 現(xiàn)貨 |
相關(guān)產(chǎn)品：
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格（元） | 貨期 |
MX4602-100MG | D-Luciferin, Sodium Salt D-熒光素（鈉鹽） | 100mg | 998 | 現(xiàn)貨 |
MX4602-500MG | D-Luciferin, Sodium Salt D-熒光素（鈉鹽） | 500mg | 2500 | 現(xiàn)貨 |
MX4601-250MG | D-Luciferin Firefly, Free Acid D-螢火蟲熒光素（游離酸） | 250mg | 1800 | 現(xiàn)貨 |
MX4604-10MG | DMNPE-caged Luciferin D-熒光素（DMNPE籠閉） | 10mg | 1350 | 現(xiàn)貨 |
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
D-Luciferin Potassium熒光素鉀鹽細(xì)胞生物
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