ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人 cAMP 反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）水平。用純
化的人 cAMP 反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微
孔中依次加入 cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB），再與HRP標(biāo)記的cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白
（CREB）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。 TMB
在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中
的 cAMP 反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD
值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）濃度。
試劑盒組成
1 20 倍濃縮洗滌液 30ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品（180ug/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個(gè)
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
注意事項(xiàng)
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未
用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間
控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。
使用目的：
本試劑盒用于測(cè)定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中 cAMP 反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）含
量。
CRBN cereblon蛋白抗體
CTRP5 補(bǔ)體C1q和腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白5抗體
CUG-BP1 胞苷尿苷鳥苷結(jié)合蛋白1抗體
Chordin 原腸胚雙向形成相關(guān)蛋白抗體
CDC123 細(xì)胞分裂周期蛋白CDC123抗體
CLN3 神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體
CKLFH3 趨化素樣因子超家族成員3抗體
CHMP1B 染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體
CIRBP 冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白抗體
CLASP1 細(xì)胞連接相關(guān)蛋白1抗體
ELISA試劑盒
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