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抗血清制備的注意事項(xiàng)

閱讀:272發(fā)布時(shí)間:2015-9-30

elisa試劑盒 抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清,一般為動(dòng)物被人工注射某類抗原后制備的動(dòng)物血清。價(jià)的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。
    一種抗原能否引起抗體生成反應(yīng),一方面取決于抗原分子表面有無(wú)抗原決定簇(Antigenic 
determinant),另一方面取決于機(jī)體的免疫狀態(tài),當(dāng)具備以上兩個(gè)條件后,抗體生成將遵循抗體生成的一般規(guī)律——初次反應(yīng)和再次反應(yīng)。
  elisa試劑盒  抗原的種類繁多,包括天然的蛋白質(zhì)抗原和細(xì)胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等,不同的抗原免疫動(dòng)物具有不同的特殊性。一般*抗原免疫動(dòng)物需加用佐劑,尤其在使用可溶性抗原時(shí),以期得到價(jià)的抗血清;合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物質(zhì)需先通過(guò)人工的方法與蛋白質(zhì)載體連接后再與佐劑混合免疫動(dòng)物,方可獲得理想的免疫效果。使用佐劑后可增加抗原的免疫原性和延長(zhǎng)抗原在機(jī)體內(nèi)存留的時(shí)間,從而改變了抗原原有的免疫原性。其注意事項(xiàng)有如下幾點(diǎn):

    1、動(dòng)物的免疫反應(yīng)存在著個(gè)體差異,甚至有人報(bào)告不同品種動(dòng)物一次免疫后產(chǎn)生的抗體的差別可高達(dá)500倍,所以制備抗血清時(shí)不能只免疫一只動(dòng)物,一般免疫3~4只,因?yàn)橛械膭?dòng)物可能產(chǎn)生抗體效價(jià)很低或不產(chǎn)生抗體,免疫反應(yīng)好的動(dòng)物所能提供的抗體往往高于一般動(dòng)物3~4倍。
    2、制成的抗原乳劑是否為油包水乳劑應(yīng)進(jìn)行檢查,否則會(huì)影響免疫效果,如不是油包水乳劑,應(yīng)重新制備。
    3、要制備價(jià)的抗體,必須要加佐劑(一般采用*福氏佐劑),加佐劑后免疫動(dòng)物,抗體效價(jià)至少可增加5倍。但也應(yīng)考慮到,如果抗原中有微量的雜蛋白存在,即使0.005mg,亦可因有佐劑而產(chǎn)生非特異性的抗體,所以要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要和抗原的純度適當(dāng)?shù)厥褂米魟?br> elisa試劑盒   4、分裝保存的抗血清應(yīng)注明抗血清的名稱,效價(jià),制備日期以及包裝量。
    5、當(dāng)抗原量過(guò)少不易提純時(shí),可采用抗原抗體在瓊脂擴(kuò)散中形成的沉淀線直接免疫動(dòng)物制備抗體。
    6、抗血清效價(jià)一般以抗血清稀釋倍數(shù)表示。血清效價(jià)的檢測(cè)方法很多,靈敏度各不同,因此在表示抗血清效價(jià)時(shí),應(yīng)標(biāo)明檢測(cè)方法。另外,在沉淀反應(yīng)中,出現(xiàn)沉淀時(shí)的抗原、抗體比例有一較大的范圍,如用不同濃度的抗原測(cè)定效價(jià)時(shí),結(jié)果會(huì)因此有別,所以在測(cè)定抗血清效價(jià)時(shí),需注意抗原的濃度。
    7、為制備單價(jià)特異性高的抗血清,所用抗原純度越高越好,因此,在純化抗原過(guò)程中應(yīng)盡量除去可能存在的雜蛋白,這樣可以省去許多時(shí)間來(lái)吸收抗血清中的非特異性抗體。

DAPK1 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體
DAPK2 凋亡相關(guān)蛋白激酶2抗體
DARPP32 多巴胺、cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體
Phospho-DARPP32  磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體
Phospho-DARPP32  磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體
Phospho-Doublecortin  磷酸化雙皮質(zhì)素抗體
Phospho-Dab1  磷酸化Disabled 1抗體
Phospho-Dab1  磷酸化Disabled 1抗體
Phospho-Dab1  磷酸化Disabled 1抗體
Doublecortin 雙皮質(zhì)素抗體
DOK2 D*激酶衰減蛋白2抗體


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