一、蛋白質(zhì)組概念：
一個(gè)細(xì)胞、一個(gè)組織或一個(gè)機(jī)體全部基因所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。
二、蛋白質(zhì)組學(xué)研究范疇
1.蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)間
2.蛋白質(zhì)和核酸之間
3.蛋白質(zhì)及其組成質(zhì)點(diǎn)的分離、分析、鑒定
4.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析
5.生理、病理或不同發(fā)育狀態(tài)下蛋白質(zhì)組表達(dá)差異
6.蛋白質(zhì)信息庫(kù)
三、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì) ELISA試劑盒
1 蛋白質(zhì)亞基聚合：構(gòu)像改變；四級(jí)結(jié)構(gòu)
2 交叉聚合：同工酶（LDH）
3 分子識(shí)別：（如抗原-抗體）
生物大分子間特異性、專(zhuān)一性的識(shí)別和結(jié)合；構(gòu)像互補(bǔ)或構(gòu)像變化產(chǎn)生互補(bǔ)的結(jié)構(gòu)域；化學(xué)基團(tuán)相互間存在足夠的結(jié)合力。
4 分子自我裝配：大分子的相互識(shí)別和結(jié)合
5 多酶復(fù)合體：多種酶相互結(jié)合形成一種新的結(jié)構(gòu)。如丙酮酸脫氫酶
四、蛋白質(zhì)間的相互作用力
蛋白質(zhì)內(nèi)部：肽鍵
蛋白質(zhì)間：非共價(jià)鍵、氫鍵、范德華力、疏水鍵、離子鍵
五、蛋白質(zhì)相互作用研究方法
1.酵母雙雜交系統(tǒng)：靈敏度較高的蛋白質(zhì)間相互作用的方法。
酵母雜交系統(tǒng)包括：轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)、報(bào)告基因和一對(duì)反式作用因子。
N端：報(bào)告基因轉(zhuǎn)錄因子特異DNA結(jié)合區(qū)；C端：調(diào)控目的基因轉(zhuǎn)錄的反式作用
因子proteinX
N端：報(bào)告基因轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄活化區(qū)； C端：調(diào)控目的基因轉(zhuǎn)錄的反式作用因
子proteinY
protein X+protein Y 報(bào)告基因轉(zhuǎn)錄
2.噬菌體展示：
研究基因工程蛋白質(zhì)間相互作用的方法?？贵w基因文庫(kù)和隨機(jī)多肽構(gòu)建，用于篩選基因工程抗體和多肽藥物。也可以使用于體內(nèi)蛋白質(zhì)的相互作用的研究。
3 生物傳感芯片質(zhì)譜
定性和定量檢測(cè)蛋白質(zhì)間相互作用的方法。以表面等離子激原共振為基礎(chǔ)的生物分子相互作用的分析技術(shù)與質(zhì)譜技術(shù)的結(jié)合。 ELISA試劑盒
１×１cm２芯片，以玻璃為支持物，上面固定羧甲基葡聚糖聚合物，將一些蛋白質(zhì)（肽）固定在上面。蛋白質(zhì)或肽樣品流過(guò)固相支持物，從而將發(fā)生相互作用的蛋白質(zhì)滯留在聚合物上。蛋白質(zhì)量的增加，使入射光折光率改變，引起共振角改變。
蛋白質(zhì)量與共振角呈線(xiàn)性關(guān)系。
該法快速、靈敏、特異，需要的蛋白質(zhì)樣品量１-１０μg ，檢測(cè)水平可達(dá)到非摩爾，度可達(dá)０.１％，檢測(cè)時(shí)間只需要１０分鐘。
4 蛋白質(zhì)工程中的定點(diǎn)誘變技術(shù)
通過(guò)蛋白質(zhì)定點(diǎn)突變，改變特異功能域，研究蛋白質(zhì)的哪些結(jié)構(gòu)對(duì)功能產(chǎn)生影響。從而發(fā)現(xiàn)與疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)。
六、蛋白質(zhì)-核酸相互作用
1.凝膠滯后實(shí)驗(yàn)
蛋白質(zhì)可以與末端標(biāo)記的核酸探針特異性結(jié)合，電泳時(shí)蛋白質(zhì)－核酸的復(fù)合物 ELISA試劑盒
比無(wú)蛋白質(zhì)的探針在凝膠中泳動(dòng)速度漫，表現(xiàn)為相對(duì)滯后。
聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)蛋白質(zhì)-核酸結(jié)合的簡(jiǎn)單、靈敏方法?？梢詸z測(cè)到微量序列特異性DNA結(jié)合蛋白。既可以檢測(cè)ＤＮＡ結(jié)合蛋白，又可以檢測(cè)ＲＮＡ結(jié)合蛋白質(zhì)?？梢澡b定這種結(jié)合是否是特異性結(jié)合。在反應(yīng)體系中加入非標(biāo)記的探針，序列相同，那么兩種探針與蛋白質(zhì)的結(jié)合存在競(jìng)爭(zhēng)性機(jī)制，隨著競(jìng)爭(zhēng)劑的增加，標(biāo)記探針與蛋白質(zhì)結(jié)合的帶型逐漸變小或消失，證明此種結(jié)合為特異性結(jié)合。
2 濾膜結(jié)合法 ELISA試劑盒
硝酸纖維素濾膜不能結(jié)合雙鏈DNA，但可以結(jié)合蛋白質(zhì)，可以將與蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA片段與游離DNA片段分離開(kāi)來(lái)的方法。
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