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平沙綠僵菌

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更新時間：2018-01-29 18:26:21瀏覽次數(shù)：344次

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產(chǎn)品簡介

平沙綠僵菌
是成體干細胞的一種我公司經(jīng)營細胞以及各類生化試劑、試劑盒、細胞、分子生物學(xué)、血清、抗體、標準品、培養(yǎng)基等品種齊全，價格實惠，質(zhì)量佳,如有需求請或在線客服！

詳細介紹

檢測原理平沙綠僵菌

細胞發(fā)生凋亡或壞死，其細胞DNA均發(fā)生斷裂，細胞內(nèi)小分子量DNA斷增加，高分子DNA減少，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細胞DNA斷裂點均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間，出現(xiàn)180－200bpDNA斷，而壞死細胞的DNA斷裂點為無特征的雜亂片斷，利用此特征可以確定群體細胞的死亡，并可與壞死細胞區(qū)別，細胞繁殖以分裂方式進行。細胞作為一個獨立生命單位，既有生長繁殖，也有衰老死亡。細胞衰老是生物有機體衰老的基礎(chǔ)。在多細胞生物的個體發(fā)育過程中，細胞常常分化成各種構(gòu)造和功能不同的細胞，如肌細胞、紅細胞和神經(jīng)細胞等都屬于高度分化的細胞。當(dāng)細胞發(fā)生癌變時，細胞便喪失其原來正常的功能，并無休止地分裂，形成腫瘤。

平沙綠僵菌操作方法

固定	培養(yǎng)細胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進行脫蠟、水化。
洗滌	玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。
反應(yīng)	洗滌后的玻片用吸水紙吸干細胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加反應(yīng)液（每50μL反應(yīng)液含TdT酶0.5μL,標記的-dUTP 1μL），使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。
終止反應(yīng)	去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。
FITC標記	洗滌后的玻片用吸水紙吸去細胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。
洗滌	將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。
PI復(fù)染	將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。
封片	用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。
交貨時間	15~20天

傳代：

1.培養(yǎng)皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。

2.把原有培養(yǎng)基吸掉。

3.加適當(dāng)?shù)?(能覆蓋細胞就行)，消化1-2分鐘。

4.細胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。

5.用移液槍吹打細胞，把細胞都懸浮起來。

6.把細胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細胞都吹起來。

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