支原體感染和細(xì)胞小黑點(diǎn)的問題總結(jié)
養(yǎng)細(xì)胞發(fā)現(xiàn)小黑點(diǎn)現(xiàn)象很嚴(yán)重，原來對(duì)“黑膠蟲”一說嗤之以鼻，認(rèn)為那不過是自欺欺人的借口，覺得怎么也不會(huì)發(fā)生在自己身上。但是真的就碰上了：要來的細(xì)胞傳代以后就出現(xiàn)細(xì)胞間黑點(diǎn)，細(xì)胞空泡化，很多類似凋亡、壞死的細(xì)胞，zui終細(xì)胞漂浮，*死亡。
上述現(xiàn)象很像所謂的“黑膠蟲”。
我感覺實(shí)際是支原體感染以后細(xì)胞生長(zhǎng)不好造成的碎片和感染原蟲（現(xiàn)在看來是些胞外囊泡，2014-4-5）的混合體。
這種現(xiàn)象的直接原因是支原體等原蟲感染，間接表象是小黑點(diǎn)，被以訛傳訛成為了“黑膠蟲”。
光鏡下看不到支原體，但是可以看到支原體感染的終末現(xiàn)象——細(xì)胞凋亡壞死，釋放出大量碎片，看起來就像小黑蟲子。
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很多人是更換血清后出現(xiàn)這種問題；
說空氣傳播的可能是一個(gè)培養(yǎng)箱的人都用了同一種血清，而不是可以通過培養(yǎng)箱空氣傳播；
感染zui可能是牛源性的支原體，通過產(chǎn)道或血行感染，所以獸用的泰樂菌素比較有效。
用plasmocin等抗支原體的藥物有效;
用巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)有效（吞噬支原體）；
很多人更換進(jìn)口血清就好了。
感染也有個(gè)疾病譜，在質(zhì)和量上從低烈度到高烈度，
所謂“細(xì)胞生長(zhǎng)不受影響”，其實(shí)是感染的烈度不高而已；
烈度高的感染就出現(xiàn)細(xì)胞大量空泡形成，細(xì)胞間空曠地帶出現(xiàn)大量黑點(diǎn)，細(xì)胞zui終凋亡、壞死，漂起來。
有些國(guó)產(chǎn)血清寫著建議滅活，其實(shí)是掛羊頭賣狗肉，那個(gè)56度30分鐘更多的是為了殺殺支原體的。實(shí)際上也有殺不死的。但可以降低產(chǎn)品的風(fēng)險(xiǎn)。
我用*（有針對(duì)支原體衣原體功效）75-100ug/ml的濃度洗了細(xì)胞和加入培養(yǎng)基中，小黑點(diǎn)確實(shí)明顯抑制。不過我想*就很難了。據(jù)說invivogen公司的plasmocin可以*，不過就成本來說不如直接更換血清。
以上是自己個(gè)人總結(jié)的一點(diǎn)看法。建議不要總拿子虛烏有的“黑膠蟲”來說事。多考慮看不到的支原體，不要還停留在培根時(shí)代——只相信自己眼睛看見的。
黑膠蟲沒碰到的時(shí)候，大家都不承認(rèn)，但是見識(shí)過之后才知道，有些東西不是我們能解釋的。
開始的時(shí)候，細(xì)胞間只是見到黑點(diǎn)一樣的雜質(zhì)，細(xì)胞狀態(tài)一般，如果勤換液，能維持住細(xì)胞狀態(tài)，但是只要發(fā)現(xiàn)做布朗運(yùn)動(dòng)的黑點(diǎn)，那么細(xì)胞的壽命也就到頭了。我們嘗試過各種方法，以下方法略微有些作用：
1、勤換培養(yǎng)液。是一天一換，雖然影響細(xì)胞生長(zhǎng)，但是能挽救他們的生命。
2、每次傳代的時(shí)候離心，1000轉(zhuǎn)以上。每次離心可以大量的減少雜質(zhì)，細(xì)胞狀態(tài)明顯好轉(zhuǎn)。
3、早傳，早凍，多留火種。每次復(fù)蘇的細(xì)胞開始幾天狀態(tài)都還是可以的，這樣很多試驗(yàn)抓緊時(shí)間就可以完成了！
另外，很多同學(xué)傾向于是支原體感染，但是我們用過抗支原體的方法，效果一般。其實(shí)還有zui重要的一點(diǎn)，用心養(yǎng)細(xì)胞，別當(dāng)作是負(fù)擔(dān)，彼此多熟悉，時(shí)間長(zhǎng)了，摸準(zhǔn)它的脾氣，就好對(duì)付了！??！
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