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閱讀:372發(fā)布時(shí)間:2017-9-1
elisa試劑盒試驗(yàn)應(yīng)留意的幾方面
大家都知道這一試驗(yàn)常用的固相酶免疫測(cè)定辦法。因?yàn)閑lisa試劑盒辦法活絡(luò),特異性強(qiáng)不需要特殊設(shè)備,所以被廣泛使用于各種抗原和抗體測(cè)定。試驗(yàn)并非可能一次便成功,咱們應(yīng)留意下面一些細(xì)節(jié):
【elisa試劑盒試驗(yàn)前預(yù)備關(guān)鍵】
1、預(yù)備各種試驗(yàn)儀器及資料(如:微量移液器、吸頭、醫(yī)用蒸餾水等)。
2、運(yùn)用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置zui少30分鐘。
3、濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1:4倍稀釋成使用樣品稀釋液。
4、濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1:19倍稀釋后變成使用洗滌液。
5、用使用樣品稀釋液來稀釋樣品,依照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的使用樣品稀釋液中,充分混勻待用。
elisa試劑盒中,規(guī)范曲線的制作與計(jì)算是全部試驗(yàn)流程的必要過程,也是關(guān)鍵過程之一。今天我公司為大家?guī)砹薊lisa規(guī)范曲線樣品檢查關(guān)鍵分享,一起來看下吧:
1.樣品的濃度等目標(biāo)是依據(jù)規(guī)范曲線計(jì)算出來的,所以首要要把做規(guī)范曲線看作是比做正式試驗(yàn)還要主要的一件事,不然后邊的試驗(yàn)成果無從談起。
2.設(shè)置規(guī)范曲線樣品的規(guī)范濃度規(guī)模要有一個(gè)比較大的跨度,而且要能包含你所要檢查試驗(yàn)樣品的濃度,即樣品的濃度要在規(guī)范曲線濃度規(guī)模以內(nèi),包含上限和下限。而關(guān)于呈s型的規(guī)范曲線,盡量要使試驗(yàn)樣品的濃度在中心斜度zui陡段,即曲線簡(jiǎn)直成直線的規(guī)模內(nèi)。
3.采用倍比稀釋法制造規(guī)范曲線中的規(guī)范樣品濃度,這樣就能夠確保規(guī)范樣品的濃度不會(huì)出現(xiàn)較大的違背。
4.檢查規(guī)范樣品時(shí),應(yīng)按濃度遞加次序進(jìn)行,以減少高濃度對(duì)低濃度的影響,進(jìn)步準(zhǔn)確性。
5.規(guī)范曲線的樣品數(shù)一般為7個(gè)點(diǎn),但zui少要確保有5個(gè)點(diǎn)。
6.做出的規(guī)范曲線相關(guān)系數(shù)因試驗(yàn)請(qǐng)求不一樣而有所變動(dòng),但一般來說,相關(guān)系數(shù)rzui少要大于0.98,關(guān)于有些試驗(yàn),zui少要0.99乃至是0.999.
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