植 物 脫 落 酸 ( A B A ) 酶 聯(lián) 免 疫 分 析
試 劑 盒 使 用 說 明 書
本 試 劑 盒 僅 供 研 究 使 用 。
檢 測 范 圍 檢 測 范 圍 檢 測 范 圍 檢 測 范 圍 ： ： ： ： 9 6 T
1 0 μ g / L - 3 0 0 μ g / L
使 用 目 的 使 用 目 的 使 用 目 的 使 用 目 的 ： ： ： ：
本 試 劑 盒 用 于 測 定 植 物 組 織 、 細(xì) 胞 及 相 關(guān) 液 體 樣 本 中 脫 落 酸 ( A B A ) 含 量 。
實(shí) 驗(yàn) 原 理 實(shí) 驗(yàn) 原 理 實(shí) 驗(yàn) 原 理 實(shí) 驗(yàn) 原 理
本 試 劑 盒 應(yīng) 用 雙 抗 體 夾 心 法 測 定 標(biāo) 本 中 植 物 脫 落 酸 ( A B A ) 水 平 。 用 純 化 的 植 物 脫 落 酸
( A B A ) 抗 體 包 被 微 孔 板 ， 制 成 固 相 抗 體 ， 往 包 被 單 抗 的 微 孔 中 依 次 加 入 植 物 脫 落 酸 ( A B A ) ，
再 與 H R P 標(biāo) 記 的 植 物 脫 落 酸 ( A B A ) 抗 體 結(jié) 合 ， 形 成 抗 體 - 抗 原 - 酶 標(biāo) 抗 體 復(fù) 合 物 ， 經(jīng) 過 徹 底 洗
滌 后 加 底 物 T M B 顯 色 。 T M B 在 H R P 酶 的 催 化 下 轉(zhuǎn) 化 成 藍(lán) 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 轉(zhuǎn) 化 成 zui 終
的 黃 色 。 顏 色 的 深 淺 和 樣 品 中 的 植 物 脫 落 酸 ( A B A ) 呈 正 相 關(guān) 。 用 酶 標(biāo) 儀 在 4 5 0 n m 波 長 下 測
定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 通 過 標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 計 算 樣 品 中 植 物 脫 落 酸 ( A B A ) 濃 度 。
試 劑 盒 組 成 試 劑 盒 組 成 試 劑 盒 組 成 試 劑 盒 組 成
1 3 0 倍 濃 縮 洗 滌 液 2 0 m l × 1 瓶 7 終 止 液 6 m l × 1 瓶
2 酶 標(biāo) 試 劑 6 m l × 1 瓶 8 標(biāo) 準(zhǔn) 品 （ 6 0 0 μ g / L ） 0 . 5 m l × 1 瓶
3 酶 標(biāo) 包 被 板 1 2 孔 × 8 條 9 標(biāo) 準(zhǔn) 品 稀 釋 液 1 . 5 m l × 1 瓶
4 樣 品 稀 釋 液 6 m l × 1 瓶 1 0 說 明 書 1 份
5 顯 色 劑 A 液 6 m l × 1 瓶 1 1 封 板 膜 2 張
6 顯 色 劑 B 液 6 m l × 1 / 瓶 1 2 密 封 袋 1 個
標(biāo) 本 標(biāo) 本 標(biāo) 本 標(biāo) 本 要 求 要 求 要 求 要 求
1 ． 標(biāo) 本 采 集 后 盡 早 進(jìn) 行 提 取 ， 提 取 按 相 關(guān) 文 獻(xiàn) 進(jìn) 行 ， 提 取 后 應(yīng) 盡 快 進(jìn) 行 實(shí) 驗(yàn) 。 若 不 能
馬 上 進(jìn) 行 試 驗(yàn) ， 可 將 標(biāo) 本 放 于 - 2 0 ℃ 保 存 ， 但 應(yīng) 避 免 反 復(fù) 凍 融
2 ． 不 能 檢 測 含 N a N 3 的 樣 品 ， 因 N a N 3 抑 制 辣 根 過 氧 化 物 酶 的 （ H R P ） 活 性 。
操 作 步 驟 操 作 步 驟 操 作 步 驟 操 作 步 驟
1 . 標(biāo) 準(zhǔn) 品 的 稀 釋 ： 本 試 劑 盒 提 供 原 倍 標(biāo) 準(zhǔn) 品 一 支 ， 用 戶 可 按 照 下 列 圖 表 在 小 試 管 中 進(jìn) 行 稀
釋 。
3 0 0 μ g / L 5 號 標(biāo) 準(zhǔn) 品 1 5 0 μ l 的 原 倍 標(biāo) 準(zhǔn) 品 加 入 1 5 0 μ l 標(biāo) 準(zhǔn) 品 稀 釋 液
1 5 0 μ g / L 4 號 標(biāo) 準(zhǔn) 品 1 5 0 μ l 的 5 號 標(biāo) 準(zhǔn) 品 加 入 1 5 0 μ l 標(biāo) 準(zhǔn) 品 稀 釋 液
7 5 μ g / L 3 號 標(biāo) 準(zhǔn) 品 1 5 0 μ l 的 4 號 標(biāo) 準(zhǔn) 品 加 入 1 5 0 μ l 標(biāo) 準(zhǔn) 品 稀 釋 液
3 7 . 5 μ g / L 2 號 標(biāo) 準(zhǔn) 品 1 5 0 μ l 的 3 號 標(biāo) 準(zhǔn) 品 加 入 1 5 0 μ l 標(biāo) 準(zhǔn) 品 稀 釋 液
1 8 . 7 5 μ g / L 1 號 標(biāo) 準(zhǔn) 品 1 5 0 μ l 的 2 號 標(biāo) 準(zhǔn) 品 加 入 1 5 0 μ l 標(biāo) 準(zhǔn) 品 稀 釋 液
2 . 加 樣 ： 分 別 設(shè) 空 白 孔 （ 空 白 對 照 孔 不 加 樣 品 及 酶 標(biāo) 試 劑 ， 其 余 各 步 操 作 相 同 ） 、 標(biāo) 準(zhǔn) 孔 、
待 測 樣 品 孔 。 在 酶 標(biāo) 包 被 板 上 標(biāo) 準(zhǔn) 品 準(zhǔn) 確 加 樣 5 0 μ l ， 待 測 樣 品 孔 中 先 加 樣 品 稀 釋 液 4 0 μ l ，
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