美國NovaBios基孔肯雅病毒核酸熒光PCR檢測試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業(yè)供應(yīng)各種進口品牌基孔肯雅熱檢測試劑盒，包括美國的NovaBios、德國NOVA、廣州創(chuàng)侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學(xué)。歡迎咨詢

基孔肯雅熱IgM診斷試劑

基孔肯雅熱IgG診斷試劑

基孔肯雅熱ELISA檢測試劑

基孔肯雅熱快速檢測試劑

基孔肯雅病毒核酸檢測試劑盒（熒光探針PCR）

美國CDC的基孔肯雅病毒診斷試劑——美國的NovaBios

德國CDC使用的基孔肯雅病毒診斷試劑——德國NOVA

美國NovaBios基孔肯雅病毒核酸熒光PCR檢測試劑盒

【預(yù)期用途】 
基孔肯雅IgG/IgM抗體ELISA檢測試劑盒主要用于定性檢測人血清和血漿中抗基孔肯雅病毒的IgG/IgM抗體。 
【實驗原理】 
此試劑盒基于ELISA技術(shù)。包被板中包被了抗人IgG抗體，如果人血清或血漿中含有IgG時，則會與其特異性結(jié)合，洗板將未結(jié)合的物質(zhì)洗去， 然后加入基孔肯雅抗原溶液，洗板洗去未結(jié)合的物質(zhì)，然后加入鏈霉親和素和基孔肯雅抗體酶聯(lián)物。洗板后，加入TMB底物液，顏色變成藍色，加入終止液終止反應(yīng)，顏色由藍色轉(zhuǎn)為黃色，zui后用酶標(biāo)儀在450nm處讀數(shù)。 
【試劑組成】 
包被板：12×8可拆卸，包被了抗人IgG抗體，密封在可重封鋁箔袋中 
基孔肯雅溶液1：1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液，即用，白蓋 
基孔肯雅溶液2：1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗體，即用，藍色，白蓋 
基孔肯雅IgM陽性質(zhì)控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，紅蓋 
基孔肯雅IgM臨界質(zhì)控：1瓶， 2mL，黃色，即用，綠蓋 
基孔肯雅IgM陰性質(zhì)控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，藍蓋 
樣本稀釋液： 1瓶包含100mL的即用緩沖液，用于稀釋樣本，pH7.2±0.2，黃色，白蓋 
洗滌液：1瓶，包含50mL  20倍濃縮的緩沖液，（pH7.2±0.2）用于洗板，白蓋 
鏈霉親和素結(jié)合液：1瓶包含6mL過氧化物酶結(jié)合的鏈霉親和素，即用，紅色，黑蓋 
TMB底物液：1瓶包含15mL  TMB，即用，黃蓋 
終止液：1瓶包含15mL，即用，內(nèi)含硫酸，0.2mol/l，紅蓋 
【需要的設(shè)備和材料】              
固定板
封板片 
酶標(biāo)儀（450/620nm）              
37℃孵箱 
洗瓶或自動洗板機
10~1000μL的移液器
漩渦混勻器 
蒸餾水或去離子水
一次性試管
計時器 
【儲存和穩(wěn)定性】 
試劑在有效期內(nèi)，儲存于2-8℃穩(wěn)定 
【試劑準(zhǔn)備】 
洗滌液的準(zhǔn)備 
用雙蒸水稀釋洗滌液，例子：10ml洗滌液+190ml雙蒸水。稀釋好的洗滌液在室溫下5天內(nèi)有效。 
【樣本的采集和準(zhǔn)備】 
這個實驗中使用的樣本是人血清和血漿，如果實驗在樣本采集后的5天內(nèi)進行，則需要儲存在2-8℃，否則，必須于-20℃到-70℃深度凍存。如果樣本是深度凍存的，在使用前，則需要充分混勻，避免反復(fù)凍融。 不推薦使用熱滅活的樣本 
【樣本的稀釋】 
將10μL樣本跟1ml的樣本稀釋液混勻，并用漩渦混勻器充分混勻。
【實驗步驟】 
在開始試驗前，請仔細閱讀試驗說明。結(jié)果的可信度是依賴于嚴(yán)格地按照實驗說明來進行的，鋪板時zui少留1個孔為空白對照（A1）1個陰性質(zhì)控孔（B1）2個臨界質(zhì)控孔（C1+D1）1個陽性質(zhì)控孔（E1）。開始試驗前，請將所有試劑都平衡到室溫 
1.  吸取50μL的質(zhì)控品和稀釋過的樣本到相應(yīng)的孔中，留A1孔做空白對照孔
2.  封板 
3.  在37±1℃下孵育1小時±5分鐘 
4.  當(dāng)孵育完成時，揭去封板片，棄去反應(yīng)液，每孔300μL洗滌液，洗板3次，避免溢出。每孔浸泡的時間都必須＞5秒，zui后拍板將殘留的液滴都拍去。 
5.  吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白對照孔的每個孔中，蓋板 
6.  在室溫孵育30分鐘 
7.  重復(fù)步驟4 
8.  將基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素結(jié)合物混勻10分鐘 
9.  吸取50μL基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素的復(fù)合物到除了空白對照孔的每個孔中，蓋板。 
10.  室溫孵育30分鐘
11.  重復(fù)步驟4 
12.  吸取100μL的TMB底物液到每個孔中 
13.  避光孵育15分鐘（精確） 
14.  加入100μL終止液到每個孔中，與加TMB底物液時的間隔和順序都必須一樣 
15.  用酶標(biāo)儀在加入終止液后30分鐘內(nèi)與450/620nm處檢測 
【檢測】 
調(diào)整酶標(biāo)儀，以空白對照孔調(diào)零，以450nm處檢測所有孔的吸光度值。 
【結(jié)果】 
1.  檢測生效的條件 
只有以下條件符合，檢測的結(jié)果才能認(rèn)為的有效的  
空白對照孔    吸光度值＜0.100  
陰性質(zhì)控孔    吸光度值＜臨界質(zhì)控  
臨界質(zhì)控孔    吸光度值0.150-1.300  
陽性質(zhì)控孔    吸光度值＞臨界質(zhì)控 
如果以上條件不符合的，那么試驗結(jié)果則是無效的，需要重新檢測
2.  結(jié)果的計算 
臨界質(zhì)控平均吸光度值的計算，例子：吸光度1：0.39；吸光度2：0.37                                   
（0.39+0.37）/2=0.38    
平均吸光度值為0.38 
3.  結(jié)果的說明 
樣本如果是比臨界值高出10%，則認(rèn)定為陽性， 
樣本如果是在臨界值上下10%之內(nèi)，則認(rèn)定為灰色區(qū)（推薦在2-4周之后再次檢測新鮮的樣本，如果樣本仍然是灰色區(qū)，可以直接認(rèn)為是陰性） 
樣本如果是比臨界值低出10%，則認(rèn)定為陰性 
4.  結(jié)果的單位 
病人樣本平均吸光度值×10 = U   
臨界值 
例子： 1.216×10 =32U 
0.38 
臨界值： 10 U 
灰色區(qū)：9-11 U 
陰性： ＜9 U 
陽性： ＞11 U

美國NovaBios

奇昆古尼亞熱
奇昆古尼亞病毒（chikungunya virus），即基孔肯雅病毒，可以引起基孔肯雅熱。它近來變得猖獗，引發(fā)了一場*的疾病暴發(fā)，感染了將近100萬人，而這場疾病發(fā)作仍然在繼續(xù)。這一病毒會導(dǎo)致發(fā)熱和關(guān)節(jié)痛，但是通常并不致命。它已經(jīng)感染了留尼汪萬人口中的1/3，自從2005年12月以來，它感染了印度南部的18萬人。
研究基孔肯雅熱
發(fā)表在《公共科學(xué)圖書館·醫(yī)學(xué)》雜志上的這項研究是由法國巴斯德研究院的Sylvain Brisse的。他們用來自留尼汪舌爾的6位患者的病毒樣本，測出了奇昆古尼亞病毒的全部遺傳序列。
他們還從來自馬達加斯加、毛里求斯、馬約特島、留尼汪塞舌爾的另外127名患者的樣本中測出了一個稱作E1的奇昆古尼亞病毒基因。
研究結(jié)果基孔肯雅熱
研究結(jié)果顯示，奇昆古尼亞熱的爆發(fā)始于一種與東非的奇昆古尼亞病毒親緣較近的毒株，它隨后演化成了幾個不同的變種。
目前zui流行的一種毒株與引起早期疾病爆發(fā)的幾種毒株在遺傳上是不同的，這些科學(xué)家說，這可以解釋為什么奇昆古尼亞病毒已經(jīng)變得更加具有侵略性。
特別地，他們說E1（基因所表達的蛋白質(zhì)）結(jié)構(gòu)上的兩處突變，可能讓這種病毒更容易在蚊子吸食了被感染者的血液之后，進入蚊子的細胞，并進行復(fù)制。
關(guān)于奇昆古尼亞病毒的zui早記載是在1952年的坦桑尼亞，它的名字來自于一個斯瓦希里語的單詞，意思是“彎曲”——意指奇昆古尼亞病毒感染者的關(guān)節(jié)腫脹，身體彎曲。
從那以后，亞非地區(qū)周期性地爆發(fā)奇昆古尼亞熱。這種病毒通常不會致命，但是當(dāng)前這場疾病爆發(fā)已經(jīng)有死亡報道。這引起了人們的擔(dān)憂，即這種病毒的遺傳突變也已經(jīng)讓它變得更加致命。
科學(xué)家現(xiàn)在正在進行實驗，試圖弄清楚哪些突變導(dǎo)致了奇昆古尼亞病毒感染人類以及致病能力明顯增加。
傳播基孔肯雅熱
發(fā)表在《公共科學(xué)圖書館·醫(yī)學(xué)》雜志上的一項研究表明，奇昆古尼亞病毒已經(jīng)發(fā)生了突變，使其更容易感染蚊子。而蚊子會把這種病毒傳給人。
去年，奇昆古尼亞病毒開始感染生活在印度洋科摩羅群島上的居民，隨后病毒擴散到了鄰近的馬達加斯加、毛里求斯、馬約特島、留尼汪url]以及塞舌爾。

美國NovaBios

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Odd quangunian fever
Chikungunya virus (chikungunya virus), that is, Chikungunya virus, can cause Chikungunya heat. It has recently become rampant, triggering an outbreak of an unprecedented disease, infecting nearly one million people, and the disease is still continuing. This virus can cause fever and joint pain, but usually not fatal. It has been infected with 1/3 of the population of Reunion, since December 2005, it has infected 18 million people in southern India.
Study of Chikungunya Heat
The study, published in the Public Library of Science and Medicine, was led by Sylvain Brisse of the Pasteur Institute in France. They used the virus samples from six patients in Niuwang Erer, and tested all the genetic sequences of the odd-quangunian virus.
They also detected a Qunkunoun virus gene called E1 from a sample of 127 other patients from Madagascar, Mauritius, Mayotte, and Reunion Seychelles.
The results of the study
The results of the study showed that the outbreak of the Qikun Guña fever began with a strain that was close to that of the odd-quasi-Qunyang virus in East Africa and subsequently evolved into several different variants.
One of the most prevalent strains is genetically different from the several strains that cause early disease outbreaks, and these scientists say that this can explain why the Qunganu virus has become more aggressive.
In particular, they say that the two mutations in the structure of the protein (expressed by the gene) may make it easier for the virus to enter the mosquito's cells after the mosquito has sucked the infected blood and replicate it.
The earliest record of the odd-quangunian virus was in Tanzania in 1952, whose name came from a word in Swahili, meaning "bend" - meaning the joints of the quake Swollen, body bent.
Since then, the Asian and African region has periodically burst out of the odd quangurgerian fever. This virus is usually not fatal, but the current outbreak of the disease has been reported dead. This raises the concern that the genetic mutation of the virus has also made it more deadly.
Scientists are now experimenting with trying to figure out which mutations have led to a significant increase in the odds of the human and pathogenic effects of the Qunganu virus.
Spread Chikungunya heat
A study published in the journal Public Library of Medicine shows that the Qikununian virus has been mutated to make it more susceptible to mosquitoes. The mosquito will pass the virus to the people.
Last year, the quinquish virus began to infect residents living in the Indian Ocean Comoros, followed by the spread of the virus to neighboring Madagascar, Mauritius, Mayotte, Reunion and Seychelles.