美國NovaBios基孔肯雅熱PCR檢測試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業(yè)供應(yīng)各種進(jìn)口品牌基孔肯雅熱檢測試劑盒，包括美國的NovaBios、德國NOVA、廣州創(chuàng)侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學(xué)。歡迎咨詢

基孔肯雅熱IgM診斷試劑

基孔肯雅熱IgG診斷試劑

基孔肯雅熱ELISA檢測試劑

基孔肯雅熱快速檢測試劑

基孔肯雅病毒核酸檢測試劑盒（熒光探針PCR）

美國CDC的基孔肯雅病毒診斷試劑——美國的NovaBios

德國CDC使用的基孔肯雅病毒診斷試劑——德國NOVA

美國NovaBios基孔肯雅熱PCR檢測試劑盒

【預(yù)期用途】 
基孔肯雅IgG/IgM抗體ELISA檢測試劑盒主要用于定性檢測人血清和血漿中抗基孔肯雅病毒的IgG/IgM抗體。 
【實(shí)驗(yàn)原理】 
此試劑盒基于ELISA技術(shù)。包被板中包被了抗人IgG抗體，如果人血清或血漿中含有IgG時，則會與其特異性結(jié)合，洗板將未結(jié)合的物質(zhì)洗去， 然后加入基孔肯雅抗原溶液，洗板洗去未結(jié)合的物質(zhì)，然后加入鏈霉親和素和基孔肯雅抗體酶聯(lián)物。洗板后，加入TMB底物液，顏色變成藍(lán)色，加入終止液終止反應(yīng)，顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色，zui后用酶標(biāo)儀在450nm處讀數(shù)。 
【試劑組成】 
包被板：12×8可拆卸，包被了抗人IgG抗體，密封在可重封鋁箔袋中 
基孔肯雅溶液1：1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液，即用，白蓋 
基孔肯雅溶液2：1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗體，即用，藍(lán)色，白蓋 
基孔肯雅IgM陽性質(zhì)控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，紅蓋 
基孔肯雅IgM臨界質(zhì)控：1瓶， 2mL，黃色，即用，綠蓋 
基孔肯雅IgM陰性質(zhì)控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，藍(lán)蓋 
樣本稀釋液： 1瓶包含100mL的即用緩沖液，用于稀釋樣本，pH7.2±0.2，黃色，白蓋 
洗滌液：1瓶，包含50mL  20倍濃縮的緩沖液，（pH7.2±0.2）用于洗板，白蓋 
鏈霉親和素結(jié)合液：1瓶包含6mL過氧化物酶結(jié)合的鏈霉親和素，即用，紅色，黑蓋 
TMB底物液：1瓶包含15mL  TMB，即用，黃蓋 
終止液：1瓶包含15mL，即用，內(nèi)含硫酸，0.2mol/l，紅蓋 
【需要的設(shè)備和材料】              
固定板
封板片 
酶標(biāo)儀（450/620nm）              
37℃孵箱 
洗瓶或自動洗板機(jī)
10~1000μL的移液器
漩渦混勻器 
蒸餾水或去離子水
一次性試管
計(jì)時器 
【儲存和穩(wěn)定性】 
試劑在有效期內(nèi)，儲存于2-8℃穩(wěn)定 
【試劑準(zhǔn)備】 
洗滌液的準(zhǔn)備 
用雙蒸水稀釋洗滌液，例子：10ml洗滌液+190ml雙蒸水。稀釋好的洗滌液在室溫下5天內(nèi)有效。 
【樣本的采集和準(zhǔn)備】 
這個實(shí)驗(yàn)中使用的樣本是人血清和血漿，如果實(shí)驗(yàn)在樣本采集后的5天內(nèi)進(jìn)行，則需要儲存在2-8℃，否則，必須于-20℃到-70℃深度凍存。如果樣本是深度凍存的，在使用前，則需要充分混勻，避免反復(fù)凍融。 不推薦使用熱滅活的樣本 
【樣本的稀釋】 
將10μL樣本跟1ml的樣本稀釋液混勻，并用漩渦混勻器充分混勻。
【實(shí)驗(yàn)步驟】 
在開始試驗(yàn)前，請仔細(xì)閱讀試驗(yàn)說明。結(jié)果的可信度是依賴于嚴(yán)格地按照實(shí)驗(yàn)說明來進(jìn)行的，鋪板時zui少留1個孔為空白對照（A1）1個陰性質(zhì)控孔（B1）2個臨界質(zhì)控孔（C1+D1）1個陽性質(zhì)控孔（E1）。開始試驗(yàn)前，請將所有試劑都平衡到室溫 
1.  吸取50μL的質(zhì)控品和稀釋過的樣本到相應(yīng)的孔中，留A1孔做空白對照孔
2.  封板 
3.  在37±1℃下孵育1小時±5分鐘 
4.  當(dāng)孵育完成時，揭去封板片，棄去反應(yīng)液，每孔300μL洗滌液，洗板3次，避免溢出。每孔浸泡的時間都必須＞5秒，zui后拍板將殘留的液滴都拍去。 
5.  吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白對照孔的每個孔中，蓋板 
6.  在室溫孵育30分鐘 
7.  重復(fù)步驟4 
8.  將基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素結(jié)合物混勻10分鐘 
9.  吸取50μL基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素的復(fù)合物到除了空白對照孔的每個孔中，蓋板。 
10.  室溫孵育30分鐘
11.  重復(fù)步驟4 
12.  吸取100μL的TMB底物液到每個孔中 
13.  避光孵育15分鐘（精確） 
14.  加入100μL終止液到每個孔中，與加TMB底物液時的間隔和順序都必須一樣 
15.  用酶標(biāo)儀在加入終止液后30分鐘內(nèi)與450/620nm處檢測 
【檢測】 
調(diào)整酶標(biāo)儀，以空白對照孔調(diào)零，以450nm處檢測所有孔的吸光度值。 
【結(jié)果】 
1.  檢測生效的條件 
只有以下條件符合，檢測的結(jié)果才能認(rèn)為的有效的  
空白對照孔    吸光度值＜0.100  
陰性質(zhì)控孔    吸光度值＜臨界質(zhì)控  
臨界質(zhì)控孔    吸光度值0.150-1.300  
陽性質(zhì)控孔    吸光度值＞臨界質(zhì)控 
如果以上條件不符合的，那么試驗(yàn)結(jié)果則是無效的，需要重新檢測
2.  結(jié)果的計(jì)算 
臨界質(zhì)控平均吸光度值的計(jì)算，例子：吸光度1：0.39；吸光度2：0.37                                   
（0.39+0.37）/2=0.38    
平均吸光度值為0.38 
3.  結(jié)果的說明 
樣本如果是比臨界值高出10%，則認(rèn)定為陽性， 
樣本如果是在臨界值上下10%之內(nèi)，則認(rèn)定為灰色區(qū)（推薦在2-4周之后再次檢測新鮮的樣本，如果樣本仍然是灰色區(qū)，可以直接認(rèn)為是陰性） 
樣本如果是比臨界值低出10%，則認(rèn)定為陰性 
4.  結(jié)果的單位 
病人樣本平均吸光度值×10 = U   
臨界值 
例子： 1.216×10 =32U 
0.38 
臨界值： 10 U 
灰色區(qū)：9-11 U 
陰性： ＜9 U 
陽性： ＞11 U

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三、檢測方法基孔肯雅熱
常用檢測方法主要有3種：血清學(xué)檢測、核酸檢測和病毒分離。一般情況下，病毒分離與核酸檢測宜采用發(fā)病后1周內(nèi)的血清；IgM抗體檢測宜采用發(fā)病4天后的血清，IgG抗體的檢測宜采用發(fā)病1周后的血清。基孔肯雅熱
（一）血清學(xué)檢測方法?；卓涎艧?br />1．特異性IgM檢測?；卓涎艧?br />采用的方法有：捕獲ELISA法（MacELISA）、間接ELISA法、免疫熒光法和免疫層析法等?；卓涎艧?br />2．特異性IgG檢測?；卓涎艧?br />采用的方法有：間接ELISA法、免疫熒光法和免疫層析法等?；卓涎艧?br />3．意義基孔肯雅熱
（1）IgM陽性結(jié)果，表明患者新近CHIKV感染，用于基孔肯雅熱早期診斷?；卓涎艧?br />（2）IgG陽性結(jié)果，表明曾受到CHIKV感染；恢復(fù)期血清抗體滴度比急性期抗體滴度有4倍或4倍以上升高則可確診。基孔肯雅熱
（二）病原學(xué)檢測方法?；卓涎艧?br />1．基孔肯雅病毒核酸檢測?；卓涎艧?br />一般發(fā)病后7日內(nèi)在多數(shù)患者的血清中可檢測到病毒核酸。凍存伊蚊標(biāo)本也可進(jìn)行基孔肯雅病毒核酸檢測。可采用RT-PCR和Real-time基孔肯雅熱RT-PCR等核酸擴(kuò)增的方法檢測。
基孔肯雅熱
2.基孔肯雅熱病毒分離鑒定?；卓涎艧?br />常用Vero、C6/36等敏感細(xì)胞系開展病毒分離，分離物可以免疫熒光法或核酸檢測進(jìn)行鑒定?；卓涎艧?br />3．意義。基孔肯雅熱
患者血清中分離到基孔肯雅熱病毒和/或檢測到病毒核酸后，可確診基孔肯雅熱病毒感染。
基孔肯雅熱流行病學(xué)調(diào)查方案基孔肯雅熱
為指導(dǎo)疾病預(yù)防控制專業(yè)人員做好基孔肯雅熱疫情的流行病學(xué)調(diào)查工作，制定本方案。基孔肯雅熱

美國NovaBios

我司還提供其它進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。

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Third, the detection method Chikungunya heat
There are three commonly used detection methods: serological detection, nucleic acid detection and virus isolation. Under normal circumstances, the virus separation and nucleic acid detection should be used within 1 week after the onset of serum; IgM antibody detection should be used after 4 days of serum, IgG antibody detection should be used after 1 week of serum. Chikungunya heat
(A) serological detection methods. Chikungunya heat
1. Specific IgM detection. Chikungunya heat
Methods: Capture ELISA (MacELISA), indirect ELISA, immunofluorescence and immunochromatography. Chikungunya heat
2. Specific IgG detection. Chikungunya heat
The methods used include indirect ELISA, immunofluorescence and immunochromatography. Chikungunya heat
3. Meaning Chikungunya heat
(1) IgM positive results, indicating that patients with recent CHIKV infection, for the early diagnosis of chikungunya fever. Chikungunya heat
(2) IgG positive results, indicating that had been CHIKV infection; convalescence serum antibody titer than the acute phase antibody titer 4 times or 4 times higher than can be confirmed. Chikungunya heat
(B) pathogen detection methods. Chikungunya heat
1. Chikungunya virus nucleic acid detection. Chikungunya heat
Viruses are detected in sera from most patients within 7 days of onset. The Aedes aegypti specimens can also be tested for Chikungunya virus nucleic acid. Can be detected by RT-PCR and Real-time Chikungunya RT-PCR and other nucleic acid amplification methods.
Chikungunya heat
Isolation and identification of Chikungunya fever virus. Chikungunya heat
Commonly used Vero, C6 / 36 and other sensitive cell lines to carry out virus isolation, isolates can be immunofluorescence or nucleic acid detection for identification. Chikungunya heat
3. significance. Chikungunya heat
Coronary heart disease can be diagnosed after isolating Chikungunya virus and / or detecting viral nucleic acids in the patient's serum.
Chikungunya fever epidemiological investigation program
To guide the disease prevention and control professionals to do the epidemiological investigation of the Chikungunya fever epidemic, the development of the program. Chikungunya heat