美國NovaBios基孔肯雅熱ELISA試劑 基孔肯雅熱ELISA檢測試劑

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業(yè)供應(yīng)各種進(jìn)口品牌基孔肯雅熱檢測試劑盒，包括美國的NovaBios、德國NOVA、廣州創(chuàng)侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學(xué)。歡迎咨詢

基孔肯雅熱IgM診斷試劑

基孔肯雅熱IgG診斷試劑

基孔肯雅熱ELISA檢測試劑

基孔肯雅熱快速檢測試劑

基孔肯雅病毒核酸檢測試劑盒（熒光探針PCR）

美國CDC的基孔肯雅病毒診斷試劑——美國的NovaBios

德國CDC使用的基孔肯雅病毒診斷試劑——德國NOVA

美國NovaBios基孔肯雅熱ELISA試劑 基孔肯雅熱ELISA檢測試劑

【預(yù)期用途】 
基孔肯雅IgG/IgM抗體ELISA檢測試劑盒主要用于定性檢測人血清和血漿中抗基孔肯雅病毒的IgG/IgM抗體。 
【實(shí)驗(yàn)原理】 
此試劑盒基于ELISA技術(shù)。包被板中包被了抗人IgG抗體，如果人血清或血漿中含有IgG時(shí)，則會(huì)與其特異性結(jié)合，洗板將未結(jié)合的物質(zhì)洗去， 然后加入基孔肯雅抗原溶液，洗板洗去未結(jié)合的物質(zhì)，然后加入鏈霉親和素和基孔肯雅抗體酶聯(lián)物。洗板后，加入TMB底物液，顏色變成藍(lán)色，加入終止液終止反應(yīng)，顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色，zui后用酶標(biāo)儀在450nm處讀數(shù)。 
【試劑組成】 
包被板：12×8可拆卸，包被了抗人IgG抗體，密封在可重封鋁箔袋中 
基孔肯雅溶液1：1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液，即用，白蓋 
基孔肯雅溶液2：1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗體，即用，藍(lán)色，白蓋 
基孔肯雅IgM陽性質(zhì)控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，紅蓋 
基孔肯雅IgM臨界質(zhì)控：1瓶， 2mL，黃色，即用，綠蓋 
基孔肯雅IgM陰性質(zhì)控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，藍(lán)蓋 
樣本稀釋液： 1瓶包含100mL的即用緩沖液，用于稀釋樣本，pH7.2±0.2，黃色，白蓋 
洗滌液：1瓶，包含50mL  20倍濃縮的緩沖液，（pH7.2±0.2）用于洗板，白蓋 
鏈霉親和素結(jié)合液：1瓶包含6mL過氧化物酶結(jié)合的鏈霉親和素，即用，紅色，黑蓋 
TMB底物液：1瓶包含15mL  TMB，即用，黃蓋 
終止液：1瓶包含15mL，即用，內(nèi)含硫酸，0.2mol/l，紅蓋 
【需要的設(shè)備和材料】              
固定板
封板片 
酶標(biāo)儀（450/620nm）              
37℃孵箱 
洗瓶或自動(dòng)洗板機(jī)
10~1000μL的移液器
漩渦混勻器 
蒸餾水或去離子水
一次性試管
計(jì)時(shí)器 
【儲(chǔ)存和穩(wěn)定性】 
試劑在有效期內(nèi)，儲(chǔ)存于2-8℃穩(wěn)定 
【試劑準(zhǔn)備】 
洗滌液的準(zhǔn)備 
用雙蒸水稀釋洗滌液，例子：10ml洗滌液+190ml雙蒸水。稀釋好的洗滌液在室溫下5天內(nèi)有效。 
【樣本的采集和準(zhǔn)備】 
這個(gè)實(shí)驗(yàn)中使用的樣本是人血清和血漿，如果實(shí)驗(yàn)在樣本采集后的5天內(nèi)進(jìn)行，則需要儲(chǔ)存在2-8℃，否則，必須于-20℃到-70℃深度凍存。如果樣本是深度凍存的，在使用前，則需要充分混勻，避免反復(fù)凍融。 不推薦使用熱滅活的樣本 
【樣本的稀釋】 
將10μL樣本跟1ml的樣本稀釋液混勻，并用漩渦混勻器充分混勻。
【實(shí)驗(yàn)步驟】 
在開始試驗(yàn)前，請(qǐng)仔細(xì)閱讀試驗(yàn)說明。結(jié)果的可信度是依賴于嚴(yán)格地按照實(shí)驗(yàn)說明來進(jìn)行的，鋪板時(shí)zui少留1個(gè)孔為空白對(duì)照（A1）1個(gè)陰性質(zhì)控孔（B1）2個(gè)臨界質(zhì)控孔（C1+D1）1個(gè)陽性質(zhì)控孔（E1）。開始試驗(yàn)前，請(qǐng)將所有試劑都平衡到室溫 
1.  吸取50μL的質(zhì)控品和稀釋過的樣本到相應(yīng)的孔中，留A1孔做空白對(duì)照孔
2.  封板 
3.  在37±1℃下孵育1小時(shí)±5分鐘 
4.  當(dāng)孵育完成時(shí)，揭去封板片，棄去反應(yīng)液，每孔300μL洗滌液，洗板3次，避免溢出。每孔浸泡的時(shí)間都必須＞5秒，zui后拍板將殘留的液滴都拍去。 
5.  吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白對(duì)照孔的每個(gè)孔中，蓋板 
6.  在室溫孵育30分鐘 
7.  重復(fù)步驟4 
8.  將基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素結(jié)合物混勻10分鐘 
9.  吸取50μL基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素的復(fù)合物到除了空白對(duì)照孔的每個(gè)孔中，蓋板。 
10.  室溫孵育30分鐘
11.  重復(fù)步驟4 
12.  吸取100μL的TMB底物液到每個(gè)孔中 
13.  避光孵育15分鐘（精確） 
14.  加入100μL終止液到每個(gè)孔中，與加TMB底物液時(shí)的間隔和順序都必須一樣 
15.  用酶標(biāo)儀在加入終止液后30分鐘內(nèi)與450/620nm處檢測 
【檢測】 
調(diào)整酶標(biāo)儀，以空白對(duì)照孔調(diào)零，以450nm處檢測所有孔的吸光度值。 
【結(jié)果】 
1.  檢測生效的條件 
只有以下條件符合，檢測的結(jié)果才能認(rèn)為的有效的  
空白對(duì)照孔    吸光度值＜0.100  
陰性質(zhì)控孔    吸光度值＜臨界質(zhì)控  
臨界質(zhì)控孔    吸光度值0.150-1.300  
陽性質(zhì)控孔    吸光度值＞臨界質(zhì)控 
如果以上條件不符合的，那么試驗(yàn)結(jié)果則是無效的，需要重新檢測
2.  結(jié)果的計(jì)算 
臨界質(zhì)控平均吸光度值的計(jì)算，例子：吸光度1：0.39；吸光度2：0.37                                   
（0.39+0.37）/2=0.38    
平均吸光度值為0.38 
3.  結(jié)果的說明 
樣本如果是比臨界值高出10%，則認(rèn)定為陽性， 
樣本如果是在臨界值上下10%之內(nèi)，則認(rèn)定為灰色區(qū)（推薦在2-4周之后再次檢測新鮮的樣本，如果樣本仍然是灰色區(qū)，可以直接認(rèn)為是陰性） 
樣本如果是比臨界值低出10%，則認(rèn)定為陰性 
4.  結(jié)果的單位 
病人樣本平均吸光度值×10 = U   
臨界值 
例子： 1.216×10 =32U 
0.38 
臨界值： 10 U 
灰色區(qū)：9-11 U 
陰性： ＜9 U 
陽性： ＞11 U

美國NovaBios 基孔肯雅熱ELISA檢測試劑

基孔肯雅熱是一種類似于登革熱的蟲媒傳染病，自去年底在加勒比海區(qū)域出現(xiàn)病例后現(xiàn)已蔓延到加勒比海周邊及美國。
本期 Medscape 發(fā)表的 CDC 專家評(píng)論中，就基孔肯雅與登革熱的鑒別、診斷及管理進(jìn)行了一一介紹。

病例簡介
在今年 5 月，密蘇里州一位 30 歲出頭的女性前往診所就診，主訴發(fā)熱、肌肉痛、關(guān)節(jié)痛 3 天。她描述了近期曾前往海地，進(jìn)行為期一周的宣教之旅，并指出自己是在返回后 3 天出現(xiàn)癥狀的。
對(duì)她進(jìn)行了登革熱（DENV）和基孔肯雅（CHIKV）病毒的血清學(xué)檢測，囑其臥床休息，并予對(duì)乙酰氨基酚止痛。數(shù)天后返回的檢驗(yàn)結(jié)果顯示，抗登革熱抗體 IgG 陽性，IgM 陰性，而抗基孔肯雅熱毒抗體 IgG 和 IgM 均為陰性。因此診斷為登革熱，并上報(bào)當(dāng)?shù)匦l(wèi)生部門。
3 周后，患者返院，訴手、腳持續(xù)性關(guān)節(jié)痛。重復(fù)登革熱和基孔肯雅熱毒血清學(xué)檢測提示，抗 -CHIKV IgM 和 IgG 抗體均為陽性，而抗 -DENV IgG 和 IgM 抗體均為陰性?？紤]到需進(jìn)行疼痛管理，患者被轉(zhuǎn)診至風(fēng)濕病專家進(jìn)行咨詢。
登革熱和基孔肯雅熱的診斷
臨床醫(yī)生在評(píng)估急性發(fā)熱性疾病的患者時(shí)，需要收集患者的旅游史。如果患者曾前往熱帶的任何地區(qū)旅行，尤其是近期出現(xiàn)基孔肯雅的加勒比海和美國地區(qū)，鑒別診斷一定要想到基孔肯雅熱和登革熱。
基孔肯雅熱和登革熱都是急性發(fā)熱性疾病，以發(fā)熱、肌痛、嗜睡為特征。部分患者可能還會(huì)出現(xiàn)斑丘疹、基孔肯雅熱、嘔吐和頭痛。
基孔肯雅熱的特征表現(xiàn)是使人衰弱的雙側(cè)多發(fā)關(guān)節(jié)痛，以及一些病例中可出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎。
盡管這些癥狀和體征可幫助鑒別登革熱和基孔肯雅熱，臨床醫(yī)生對(duì)于急性發(fā)熱性疾病且近期有熱帶地區(qū)旅游史的患者進(jìn)行鑒別診斷時(shí)，應(yīng)同時(shí)考慮到這兩種疾病。此外還應(yīng)對(duì)這些患者進(jìn)行其他疾病的評(píng)估，包括瘧疾、細(xì)螺旋體病和其他細(xì)菌感染。

美國提高對(duì)登革熱和基孔肯雅熱的重視
基孔肯雅熱病毒于 2013 年末進(jìn)入加勒比海地區(qū)。直至 2014 年 9 月 5 日，加勒比海地區(qū)和美國一共報(bào)告了超過 65 萬臨床病例。其中包括超過 750 例的旅行相關(guān)病例，患者在境外感染，返回美國后發(fā)病?；卓涎诺妮斎雽?dǎo)致佛羅里達(dá)州至少出現(xiàn) 8 例當(dāng)?shù)孬@得基孔肯雅熱染的病例。
因?yàn)樵诩永毡群Ｋ谢卓涎帕餍械牡貐^(qū)均有登革熱的流行，而美國正在經(jīng)歷基孔肯雅的爆發(fā)，因此對(duì)從這些地區(qū)返回出現(xiàn)急性發(fā)熱性疾病的患者，對(duì)其鑒別診斷應(yīng)同時(shí)包括登革熱和基孔肯雅熱。
對(duì)疑似基孔肯雅熱和登革熱病例的診斷實(shí)驗(yàn)
在起病的前 5 天，應(yīng)對(duì)疑似病例的血清進(jìn)行 RT-PCR 檢測，以直接檢測 CHIKV 或 DENV 核酸。出現(xiàn)癥狀 5 天或更長時(shí)間后收集到的血清樣本則可通過免疫分析檢測抗 -CHIKV 和抗 -DENV IgM 抗體。
若zui初的結(jié)果是陰性，但仍懷疑登革熱或基孔肯雅熱，應(yīng)在起病 7 天或更長時(shí)間后再次收集恢復(fù)期血清，重新檢測 IgM 抗體。

美國NovaBios 基孔肯雅熱ELISA檢測試劑

我司還提供其它進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。

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Chikungunya fever is an infectious disease similar to dengue fever, which has spread to the Caribbean and the United States since the end of last year in the Caribbean region.
Medscape published in the current CDC expert commentary on the identification of Chikungunya and dengue fever, diagnosis and management were introduced.

Case brief
In May this year, a 30-year-old Missouri woman went to the clinic for treatment, fever, muscle pain, joint pain for 3 days. She described the recent trip to Haiti for a week-long mission tour and pointed out that he was symptomatic three days after the return.
(DENV) and Chikungunya (CHIKV) virus serological tests, told their bed rest, and to acetaminophen pain. A few days later returned to the test results showed that anti-dengue fever antibody IgG positive, IgM negative, and anti-cardinal Kanya heat antibody IgG and IgM were negative. So the diagnosis of dengue fever, and reported to the local health sector.
3 weeks later, the patient returned to hospital, hand, foot joint pain. Repeated dengue fever and Chikungunya fever test showed that anti-CHIKV IgM and IgG antibodies were positive, while anti-DENV IgG and IgM antibodies were negative. Taking into account the need for pain management, patients were referred to rheumatologists to consult.
Diagnosis of dengue fever and chikungunya fever
Clinicians need to collect patient travel history when assessing patients with acute febrile disease. If the patient travels to any area of ??the tropics, especially in the recent Caribbean and American areas of Chikungunya, the differential diagnosis must be considered for Chikungunya fever and dengue fever.
Chikungunya fever and dengue fever are acute febrile diseases characterized by fever, myalgia and drowsiness. Some patients may also have spotted pimples, chikungunya fever, vomiting and headache.
Chikungunya heat characteristics of the performance of the people are weak bilateral joint pain, and some cases can occur in arthritis.
Although these symptoms and signs can help identify dengue and Chikungunya fever, clinicians should also consider these two diseases when diagnosing patients with acute febrile diseases and recent tropical history of travel. In addition, these patients should be evaluated for other diseases, including malaria, leptospirosis and other bacterial infections.

The United States has increased attention to dengue and Chikungunya
Chikungunya fever virus entered the Caribbean at the end of 2013. Until September 5, 2014, the Caribbean and the United States reported a total of more than 650,000 clinical cases. Which includes more than 750 cases of travel-related cases, patients infected outside the United States after the onset of the disease. Chikungunya's input led to at least 8 cases of local access to Chikungunya fever in Florida.
Because there are dengue epidemic in all areas of the Chikungunya epidemic in the Caribbean, and the United States is experiencing the outbreak of Chikungunya, the differential diagnosis of patients with acute febrile diseases from these areas should include both Dengue and Chikungunya heat.
Diagnostic test of suspected cases of chikungunya fever and dengue fever
In the first 5 days of onset, serum of suspected cases should be subjected to RT-PCR for direct detection of CHIKV or DENV nucleic acids. The serum samples collected after 5 days or more of the symptoms can be tested for anti-CHIKV and anti-DENV IgM antibodies by immunoassay.
If the initial result is negative, but still suspected dengue or Chikungunya heat, should be in the onset of 7 days or more after the recovery of serum recovery, re-detection of IgM antibodies.