美國(guó)NovaBios基孔肯雅熱IgM抗體檢測(cè)試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業(yè)供應(yīng)各種進(jìn)口品牌基孔肯雅熱檢測(cè)試劑盒，包括美國(guó)的NovaBios、德國(guó)NOVA、廣州創(chuàng)侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學(xué)。歡迎咨詢

基孔肯雅熱IgM診斷試劑

基孔肯雅熱IgG診斷試劑

基孔肯雅熱ELISA檢測(cè)試劑

基孔肯雅熱快速檢測(cè)試劑

基孔肯雅病毒核酸檢測(cè)試劑盒（熒光探針PCR）

美國(guó)CDC的基孔肯雅病毒診斷試劑——美國(guó)的NovaBios

德國(guó)CDC使用的基孔肯雅病毒診斷試劑——德國(guó)NOVA

美國(guó)NovaBios基孔肯雅熱IgM抗體檢測(cè)試劑盒

【預(yù)期用途】 
基孔肯雅IgG/IgM抗體ELISA檢測(cè)試劑盒主要用于定性檢測(cè)人血清和血漿中抗基孔肯雅病毒的IgG/IgM抗體。 
【實(shí)驗(yàn)原理】 
此試劑盒基于ELISA技術(shù)。包被板中包被了抗人IgG抗體，如果人血清或血漿中含有IgG時(shí)，則會(huì)與其特異性結(jié)合，洗板將未結(jié)合的物質(zhì)洗去， 然后加入基孔肯雅抗原溶液，洗板洗去未結(jié)合的物質(zhì)，然后加入鏈霉親和素和基孔肯雅抗體酶聯(lián)物。洗板后，加入TMB底物液，顏色變成藍(lán)色，加入終止液終止反應(yīng)，顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色，zui后用酶標(biāo)儀在450nm處讀數(shù)。 
【試劑組成】 
包被板：12×8可拆卸，包被了抗人IgG抗體，密封在可重封鋁箔袋中 
基孔肯雅溶液1：1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液，即用，白蓋 
基孔肯雅溶液2：1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗體，即用，藍(lán)色，白蓋 
基孔肯雅IgM陽(yáng)性質(zhì)控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，紅蓋 
基孔肯雅IgM臨界質(zhì)控：1瓶， 2mL，黃色，即用，綠蓋 
基孔肯雅IgM陰性質(zhì)控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，藍(lán)蓋 
樣本稀釋液： 1瓶包含100mL的即用緩沖液，用于稀釋樣本，pH7.2±0.2，黃色，白蓋 
洗滌液：1瓶，包含50mL  20倍濃縮的緩沖液，（pH7.2±0.2）用于洗板，白蓋 
鏈霉親和素結(jié)合液：1瓶包含6mL過(guò)氧化物酶結(jié)合的鏈霉親和素，即用，紅色，黑蓋 
TMB底物液：1瓶包含15mL  TMB，即用，黃蓋 
終止液：1瓶包含15mL，即用，內(nèi)含硫酸，0.2mol/l，紅蓋 
【需要的設(shè)備和材料】              
固定板
封板片 
酶標(biāo)儀（450/620nm）              
37℃孵箱 
洗瓶或自動(dòng)洗板機(jī)
10~1000μL的移液器
漩渦混勻器 
蒸餾水或去離子水
一次性試管
計(jì)時(shí)器 
【儲(chǔ)存和穩(wěn)定性】 
試劑在有效期內(nèi)，儲(chǔ)存于2-8℃穩(wěn)定 
【試劑準(zhǔn)備】 
洗滌液的準(zhǔn)備 
用雙蒸水稀釋洗滌液，例子：10ml洗滌液+190ml雙蒸水。稀釋好的洗滌液在室溫下5天內(nèi)有效。 
【樣本的采集和準(zhǔn)備】 
這個(gè)實(shí)驗(yàn)中使用的樣本是人血清和血漿，如果實(shí)驗(yàn)在樣本采集后的5天內(nèi)進(jìn)行，則需要儲(chǔ)存在2-8℃，否則，必須于-20℃到-70℃深度凍存。如果樣本是深度凍存的，在使用前，則需要充分混勻，避免反復(fù)凍融。 不推薦使用熱滅活的樣本 
【樣本的稀釋】 
將10μL樣本跟1ml的樣本稀釋液混勻，并用漩渦混勻器充分混勻。
【實(shí)驗(yàn)步驟】 
在開始試驗(yàn)前，請(qǐng)仔細(xì)閱讀試驗(yàn)說(shuō)明。結(jié)果的可信度是依賴于嚴(yán)格地按照實(shí)驗(yàn)說(shuō)明來(lái)進(jìn)行的，鋪板時(shí)zui少留1個(gè)孔為空白對(duì)照（A1）1個(gè)陰性質(zhì)控孔（B1）2個(gè)臨界質(zhì)控孔（C1+D1）1個(gè)陽(yáng)性質(zhì)控孔（E1）。開始試驗(yàn)前，請(qǐng)將所有試劑都平衡到室溫 
1.  吸取50μL的質(zhì)控品和稀釋過(guò)的樣本到相應(yīng)的孔中，留A1孔做空白對(duì)照孔
2.  封板 
3.  在37±1℃下孵育1小時(shí)±5分鐘 
4.  當(dāng)孵育完成時(shí)，揭去封板片，棄去反應(yīng)液，每孔300μL洗滌液，洗板3次，避免溢出。每孔浸泡的時(shí)間都必須＞5秒，zui后拍板將殘留的液滴都拍去。 
5.  吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白對(duì)照孔的每個(gè)孔中，蓋板 
6.  在室溫孵育30分鐘 
7.  重復(fù)步驟4 
8.  將基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素結(jié)合物混勻10分鐘 
9.  吸取50μL基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素的復(fù)合物到除了空白對(duì)照孔的每個(gè)孔中，蓋板。 
10.  室溫孵育30分鐘
11.  重復(fù)步驟4 
12.  吸取100μL的TMB底物液到每個(gè)孔中 
13.  避光孵育15分鐘（精確） 
14.  加入100μL終止液到每個(gè)孔中，與加TMB底物液時(shí)的間隔和順序都必須一樣 
15.  用酶標(biāo)儀在加入終止液后30分鐘內(nèi)與450/620nm處檢測(cè) 
【檢測(cè)】 
調(diào)整酶標(biāo)儀，以空白對(duì)照孔調(diào)零，以450nm處檢測(cè)所有孔的吸光度值。 
【結(jié)果】 
1.  檢測(cè)生效的條件 
只有以下條件符合，檢測(cè)的結(jié)果才能認(rèn)為的有效的  
空白對(duì)照孔    吸光度值＜0.100  
陰性質(zhì)控孔    吸光度值＜臨界質(zhì)控  
臨界質(zhì)控孔    吸光度值0.150-1.300  
陽(yáng)性質(zhì)控孔    吸光度值＞臨界質(zhì)控 
如果以上條件不符合的，那么試驗(yàn)結(jié)果則是無(wú)效的，需要重新檢測(cè)
2.  結(jié)果的計(jì)算 
臨界質(zhì)控平均吸光度值的計(jì)算，例子：吸光度1：0.39；吸光度2：0.37                                   
（0.39+0.37）/2=0.38    
平均吸光度值為0.38 
3.  結(jié)果的說(shuō)明 
樣本如果是比臨界值高出10%，則認(rèn)定為陽(yáng)性， 
樣本如果是在臨界值上下10%之內(nèi)，則認(rèn)定為灰色區(qū)（推薦在2-4周之后再次檢測(cè)新鮮的樣本，如果樣本仍然是灰色區(qū)，可以直接認(rèn)為是陰性） 
樣本如果是比臨界值低出10%，則認(rèn)定為陰性 
4.  結(jié)果的單位 
病人樣本平均吸光度值×10 = U   
臨界值 
例子： 1.216×10 =32U 
0.38 
臨界值： 10 U 
灰色區(qū)：9-11 U 
陰性： ＜9 U 
陽(yáng)性： ＞11 U

美國(guó)NovaBios

基孔肯雅熱
基孔肯雅熱基孔肯雅熱
人被感染CHIKV的蚊子叮咬，約2天后即可發(fā)病。發(fā)病后第1～2天是高病毒血癥期，第3～4天病毒載量下降，通常第5天消失。病毒通過(guò)其包膜上的E1、E2蛋白與巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、室管壁膜細(xì)胞、小腦膜細(xì)胞等細(xì)胞上的受體結(jié)合，然后通過(guò)網(wǎng)格蛋白(calthrin)介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，并在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，導(dǎo)致細(xì)胞壞死和凋亡。
病毒還可通過(guò)胎盤感染胎兒，導(dǎo)致基孔肯雅熱或胎兒死亡。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明病毒易侵犯新生小鼠的中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肝、脾及結(jié)締組織。
免疫機(jī)制
有研究發(fā)現(xiàn)，患者病后2～6天血清中一些細(xì)胞因子濃度增高，如干擾素g誘導(dǎo)蛋白-10(CXCL-10)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)、單核細(xì)胞化學(xué)趨化蛋白-1（MCP-1)和干擾素g誘導(dǎo)的單核因子（MIG/CXCL9)等，而且以CXCL-10增高為主?；颊哐逯懈蓴_素g、腫瘤壞死因子a及Th2細(xì)胞因子，如IL-1b、IL-6、IL-10和IL-12的濃度保持在正常范圍。在恢復(fù)期，CXCL-10和MCP-1的濃度下降，由于CXCL-10的功能是在細(xì)胞免疫反應(yīng)中對(duì)Th1細(xì)胞起化學(xué)趨化作用，因此病情嚴(yán)重程度及進(jìn)展可能與其濃度持續(xù)在高水平相關(guān)。另外，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，干擾素a起著主要的抗病毒作用。
臨床表現(xiàn)/基孔肯雅熱 基孔肯雅熱
感染“基孔肯雅”病毒的留尼旺島居民出現(xiàn)嚴(yán)重蛻皮癥狀
感染“基孔肯雅”病毒的留尼旺島居民出現(xiàn)嚴(yán)重蛻皮癥狀基孔肯雅熱
本病的潛伏期為2～12天，通常為3～7天。
急性期
1. 發(fā)熱： 病人常突然起病，寒戰(zhàn)、發(fā)熱，體溫可達(dá)39℃，伴有頭痛、基孔肯雅熱、嘔吐、食欲減退，淋巴結(jié)腫大。一般發(fā)熱1～7天即可退熱，有的病人約3天后再次出現(xiàn)較輕微發(fā)熱（雙峰熱），持續(xù)3～5天恢復(fù)正常。有些患者可有結(jié)膜充血和輕度畏光的結(jié)膜炎表現(xiàn)。
2. 皮疹： 80％的患者在發(fā)病后2～5天，軀干、四肢的伸展側(cè)、手掌和足底出現(xiàn)皮疹，為斑疹、丘疹或紫癜 ,疹間皮膚多為正常 ,部分患者伴有瘙癢感。數(shù)天后消退，可伴有輕微脫屑。

美國(guó)NovaBios

我司還提供其它進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國(guó)SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。

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Chikungunya heat
Chikungunya Hot Foundation Kong Kenya Heat
People are infected with CHIKV mosquito bites, about 2 days after the disease. 1 to 2 days after the onset of high viremia, 3 to 4 days after the viral load decreased, usually disappear on the 5th day. The virus binds to the receptors on cells such as macrophages, epithelial cells, endothelial cells, fibroblasts, perivascular membrane cells, cerebellar cells, and the like through its E1, E2 proteins on the envelope, and then through the cytosol (calthrin ) - mediated endocytosis into cells and replicate in cells, leading to cell necrosis and apoptosis.
The virus can also infect the fetus through the placenta, resulting in Chikungunya fever or fetal death.
Animal experiments have shown that the virus is susceptible to the central nervous system, liver, spleen and connective tissue of newborn mice.
Immune mechanism
It has been found that some cytokines have a higher concentration of cytokines in the serum 2 to 6 days after treatment, such as interferon g-induced protein-10 (CXCL-10), interleukin-8 (IL-8), monocyte chemotaxis Protein-1 (MCP-1) and interferon g-induced mononuclear factor (MIG / CXCL9), and the increase of CXCL-10. Serum concentrations of interferon g, tumor necrosis factor a and Th2 cytokines, such as IL-1b, IL-6, IL-10 and IL-12, remained in the normal range. In the convalescent phase, the concentration of CXCL-10 and MCP-1 decreased, and the CXCL-10 function was chemo-chemotactic effects on Th1 cells in the cellular immune response, and the severity and progression of the CXCL-10 may be associated with a high level The In addition, animal experiments have shown that interferon a plays a major antiviral activity.
Clinical manifestations / Chikungunya fever baskan yanya heat
Resuscitation "Chikungunya" virus residents of Reunion have severe molting symptoms
Infectious "Chikungunya" virus residents of Reunion have severe molting symptoms Chikungunya fever
The incubation period of this disease is 2 to 12 days, usually 3 to 7 days.
Acute phase
1. fever: patients often sudden onset, chills, fever, body temperature up to 39 ℃, accompanied by headache, Chikungunya heat, vomiting, loss of appetite, lymph nodes. General fever 1 to 7 days to fever, and some patients about 3 days after the emergence of a slight fever (bimodal heat), for 3 to 5 days to return to normal. Some patients may have conjunctival hyperemia and mild photophobia.
2. Rash: 80% of patients in the onset of 2 to 5 days after the trunk, limbs stretch side, palms and foot rash, rash, pimples or purpura, rash between the skin is normal, some patients with itching sense. After a few days subsided, may be accompanied by a slight desquamation.