美國(guó)NovaBios基孔肯雅熱檢測(cè)試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業(yè)供應(yīng)各種進(jìn)口品牌基孔肯雅熱檢測(cè)試劑盒，包括美國(guó)的NovaBios、德國(guó)NOVA、廣州創(chuàng)侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學(xué)。歡迎咨詢

基孔肯雅熱IgM診斷試劑

基孔肯雅熱IgG診斷試劑

基孔肯雅熱ELISA檢測(cè)試劑

基孔肯雅熱快速檢測(cè)試劑

基孔肯雅病毒核酸檢測(cè)試劑盒（熒光探針PCR）

美國(guó)CDC的基孔肯雅病毒診斷試劑——美國(guó)的NovaBios

德國(guó)CDC使用的基孔肯雅病毒診斷試劑——德國(guó)NOVA

美國(guó)NovaBios基孔肯雅熱檢測(cè)試劑盒

【預(yù)期用途】 
基孔肯雅IgG/IgM抗體ELISA檢測(cè)試劑盒主要用于定性檢測(cè)人血清和血漿中抗基孔肯雅病毒的IgG/IgM抗體。 
【實(shí)驗(yàn)原理】 
此試劑盒基于ELISA技術(shù)。包被板中包被了抗人IgG抗體，如果人血清或血漿中含有IgG時(shí)，則會(huì)與其特異性結(jié)合，洗板將未結(jié)合的物質(zhì)洗去， 然后加入基孔肯雅抗原溶液，洗板洗去未結(jié)合的物質(zhì)，然后加入鏈霉親和素和基孔肯雅抗體酶聯(lián)物。洗板后，加入TMB底物液，顏色變成藍(lán)色，加入終止液終止反應(yīng)，顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色，zui后用酶標(biāo)儀在450nm處讀數(shù)。 
【試劑組成】 
包被板：12×8可拆卸，包被了抗人IgG抗體，密封在可重封鋁箔袋中 
基孔肯雅溶液1：1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液，即用，白蓋 
基孔肯雅溶液2：1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗體，即用，藍(lán)色，白蓋 
基孔肯雅IgM陽(yáng)性質(zhì)控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，紅蓋 
基孔肯雅IgM臨界質(zhì)控：1瓶， 2mL，黃色，即用，綠蓋 
基孔肯雅IgM陰性質(zhì)控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，藍(lán)蓋 
樣本稀釋液： 1瓶包含100mL的即用緩沖液，用于稀釋樣本，pH7.2±0.2，黃色，白蓋 
洗滌液：1瓶，包含50mL  20倍濃縮的緩沖液，（pH7.2±0.2）用于洗板，白蓋 
鏈霉親和素結(jié)合液：1瓶包含6mL過(guò)氧化物酶結(jié)合的鏈霉親和素，即用，紅色，黑蓋 
TMB底物液：1瓶包含15mL  TMB，即用，黃蓋 
終止液：1瓶包含15mL，即用，內(nèi)含硫酸，0.2mol/l，紅蓋 
【需要的設(shè)備和材料】              
固定板
封板片 
酶標(biāo)儀（450/620nm）              
37℃孵箱 
洗瓶或自動(dòng)洗板機(jī)
10~1000μL的移液器
漩渦混勻器 
蒸餾水或去離子水
一次性試管
計(jì)時(shí)器 
【儲(chǔ)存和穩(wěn)定性】 
試劑在有效期內(nèi)，儲(chǔ)存于2-8℃穩(wěn)定 
【試劑準(zhǔn)備】 
洗滌液的準(zhǔn)備 
用雙蒸水稀釋洗滌液，例子：10ml洗滌液+190ml雙蒸水。稀釋好的洗滌液在室溫下5天內(nèi)有效。 
【樣本的采集和準(zhǔn)備】 
這個(gè)實(shí)驗(yàn)中使用的樣本是人血清和血漿，如果實(shí)驗(yàn)在樣本采集后的5天內(nèi)進(jìn)行，則需要儲(chǔ)存在2-8℃，否則，必須于-20℃到-70℃深度凍存。如果樣本是深度凍存的，在使用前，則需要充分混勻，避免反復(fù)凍融。 不推薦使用熱滅活的樣本 
【樣本的稀釋】 
將10μL樣本跟1ml的樣本稀釋液混勻，并用漩渦混勻器充分混勻。
【實(shí)驗(yàn)步驟】 
在開始試驗(yàn)前，請(qǐng)仔細(xì)閱讀試驗(yàn)說(shuō)明。結(jié)果的可信度是依賴于嚴(yán)格地按照實(shí)驗(yàn)說(shuō)明來(lái)進(jìn)行的，鋪板時(shí)zui少留1個(gè)孔為空白對(duì)照（A1）1個(gè)陰性質(zhì)控孔（B1）2個(gè)臨界質(zhì)控孔（C1+D1）1個(gè)陽(yáng)性質(zhì)控孔（E1）。開始試驗(yàn)前，請(qǐng)將所有試劑都平衡到室溫 
1.  吸取50μL的質(zhì)控品和稀釋過(guò)的樣本到相應(yīng)的孔中，留A1孔做空白對(duì)照孔
2.  封板 
3.  在37±1℃下孵育1小時(shí)±5分鐘 
4.  當(dāng)孵育完成時(shí)，揭去封板片，棄去反應(yīng)液，每孔300μL洗滌液，洗板3次，避免溢出。每孔浸泡的時(shí)間都必須＞5秒，zui后拍板將殘留的液滴都拍去。 
5.  吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白對(duì)照孔的每個(gè)孔中，蓋板 
6.  在室溫孵育30分鐘 
7.  重復(fù)步驟4 
8.  將基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素結(jié)合物混勻10分鐘 
9.  吸取50μL基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素的復(fù)合物到除了空白對(duì)照孔的每個(gè)孔中，蓋板。 
10.  室溫孵育30分鐘
11.  重復(fù)步驟4 
12.  吸取100μL的TMB底物液到每個(gè)孔中 
13.  避光孵育15分鐘（精確） 
14.  加入100μL終止液到每個(gè)孔中，與加TMB底物液時(shí)的間隔和順序都必須一樣 
15.  用酶標(biāo)儀在加入終止液后30分鐘內(nèi)與450/620nm處檢測(cè) 
【檢測(cè)】 
調(diào)整酶標(biāo)儀，以空白對(duì)照孔調(diào)零，以450nm處檢測(cè)所有孔的吸光度值。 
【結(jié)果】 
1.  檢測(cè)生效的條件 
只有以下條件符合，檢測(cè)的結(jié)果才能認(rèn)為的有效的  
空白對(duì)照孔    吸光度值＜0.100  
陰性質(zhì)控孔    吸光度值＜臨界質(zhì)控  
臨界質(zhì)控孔    吸光度值0.150-1.300  
陽(yáng)性質(zhì)控孔    吸光度值＞臨界質(zhì)控 
如果以上條件不符合的，那么試驗(yàn)結(jié)果則是無(wú)效的，需要重新檢測(cè)
2.  結(jié)果的計(jì)算 
臨界質(zhì)控平均吸光度值的計(jì)算，例子：吸光度1：0.39；吸光度2：0.37                                   
（0.39+0.37）/2=0.38    
平均吸光度值為0.38 
3.  結(jié)果的說(shuō)明 
樣本如果是比臨界值高出10%，則認(rèn)定為陽(yáng)性， 
樣本如果是在臨界值上下10%之內(nèi)，則認(rèn)定為灰色區(qū)（推薦在2-4周之后再次檢測(cè)新鮮的樣本，如果樣本仍然是灰色區(qū)，可以直接認(rèn)為是陰性） 
樣本如果是比臨界值低出10%，則認(rèn)定為陰性 
4.  結(jié)果的單位 
病人樣本平均吸光度值×10 = U   
臨界值 
例子： 1.216×10 =32U 
0.38 
臨界值： 10 U 
灰色區(qū)：9-11 U 
陰性： ＜9 U 
陽(yáng)性： ＞11 U

美國(guó)NovaBios基孔肯雅熱檢測(cè)試劑盒

基孔肯雅熱
基孔肯雅熱是由基孔肯雅病毒（CHIKV）引起，經(jīng)伊蚊傳播，以發(fā)熱、皮疹及關(guān)節(jié)疼痛為主要特征的急性傳染病。1952年*在坦桑尼亞證實(shí)了基孔肯雅熱流行，1956年分離到病毒。本病主要流行于非洲和東南亞地區(qū)，近年在印度洋地區(qū)造成了大規(guī)模流行。
傳播途徑
埃及伊蚊和白紋伊蚊是本病的主要傳播媒介。主要通過(guò)感染病毒的伊蚊叮咬而傳播。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)可能通過(guò)氣溶膠傳播，目前尚無(wú)直接人傳人的報(bào)道。
人群易感性：人對(duì)CHIKV普遍易感，感染后可表現(xiàn)為顯基孔肯雅熱染或隱基孔肯雅熱染。
臨床表現(xiàn)
本病的潛伏期為2～12天，通常為3～7天。
1.急性期
（1）發(fā)熱病人常突然起病，寒戰(zhàn)、發(fā)熱，體溫可達(dá)39℃，伴有頭痛、基孔肯雅熱、嘔吐、食欲減退，淋巴結(jié)腫大。一般發(fā)熱1～7天即可退熱，有的病人約3天后再次出現(xiàn)較輕微發(fā)熱（雙峰熱），持續(xù)3～5天恢復(fù)正常。有些患者可有結(jié)膜充血和輕度畏光的結(jié)膜炎表現(xiàn)。
（2）皮疹80%的患者在發(fā)病后2～5天，軀干、四肢的伸展側(cè)、手掌和足底出現(xiàn)皮疹，為斑疹、丘疹或紫癜，疹間皮膚多為正常，部分患者伴有瘙癢感。數(shù)天后消退，可伴有輕微脫屑。
（3）關(guān)節(jié)疼痛發(fā)熱同時(shí)，多個(gè)關(guān)節(jié)和脊椎出現(xiàn)疼痛、關(guān)節(jié)腫脹，可伴有全身性肌痛。關(guān)節(jié)痛多為游走性，隨運(yùn)動(dòng)加劇，晨間較重。病情發(fā)展迅速，往往在數(shù)分鐘或數(shù)小時(shí)內(nèi)關(guān)節(jié)功能喪失，不能活動(dòng)。主要累及小關(guān)節(jié)，如手、腕、踝和趾關(guān)節(jié)等，也可能涉及膝和肩等大關(guān)節(jié)，腕關(guān)節(jié)受壓引起的劇烈疼痛是本病的特點(diǎn)。關(guān)節(jié)積液少見。X線檢查正常。
（4）其他極少數(shù)患者可出現(xiàn)腦膜腦炎、肝功能損傷、心肌炎及皮膚黏膜出血。
2.恢復(fù)期
急性期后，絕大多數(shù)患者的關(guān)節(jié)疼痛及僵硬狀態(tài)可*恢復(fù)。部分患者持續(xù)性關(guān)節(jié)疼痛和僵硬可達(dá)數(shù)周至數(shù)月，甚至3年以上。個(gè)別患者留有關(guān)節(jié)功能受損等后遺癥。
檢查
1.一般檢查
（1）血常規(guī)檢查白細(xì)胞計(jì)數(shù)多為正常，少數(shù)患者白細(xì)胞總數(shù)及淋巴細(xì)胞減少、血小板輕度降低。
（2）生化檢查部分患者血清ALT、AST、肌酸激酶（CK）升高。
（3）腦脊液檢查腦膜腦炎患者腦脊液檢查符合病毒性損傷的改變。
2.血清學(xué)檢查
（1）血清特異性IgM抗體采用ELISA、免疫層析等方法檢測(cè)，捕獲法檢測(cè)IgM抗體的結(jié)果較為可靠。一般情況下，發(fā)病后第1天出現(xiàn)IgM抗體，第5天多數(shù)患者呈陽(yáng)性。
（2）血清特異性IgG抗體采用ELISA、免疫熒光抗體測(cè)定（IFA）、免疫層析等方法檢測(cè)。一般情況下，發(fā)病后第2天出現(xiàn)IgG抗體，第5天多數(shù)患者呈陽(yáng)性。
3.病原學(xué)檢查
（1）核酸檢測(cè)采用RT-PCR和Real-timePCR等核酸擴(kuò)增方法檢測(cè)。一般發(fā)病后4天內(nèi)在多數(shù)患者的血清中可檢測(cè)到病毒核酸。
（2）病毒分離采集發(fā)病2天內(nèi)患者血清標(biāo)本，用Vero、C6/36、BHK-21和HeLa等敏感細(xì)胞進(jìn)行病毒分離。

美國(guó)NovaBios

我司還提供其它進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國(guó)SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。

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Chikungunya heat
Chikungunya fever is caused by Chikungunya virus (CHIKV), caused by Aedes mosquito to fever, rash and joint pain as the main feature of acute infectious diseases. In 1952 for the first time in Tanzania confirmed the Chikungunya hot epidemic, isolated virus in 1956. The disease is mainly prevalent in Africa and Southeast Asia, in recent years in the Indian Ocean region caused a large-scale epidemic.
way for spreading
Aedes albopictus and Aedes albopictus are the main vectors of this disease. Mainly through the infected mosquito bites and spread. Laboratory may spread through the aerosol, there is no direct human reports.
Susceptibility to the crowd: people generally susceptible to CHIKV, after infection can be expressed as a significant hole Kenya hot dye or hidden base Kenya hot dye.
Clinical manifestations
The incubation period of this disease is 2 to 12 days, usually 3 to 7 days.
Acute phase
(1) fever patients often sudden onset, chills, fever, body temperature up to 39 ℃, accompanied by headache, Chikungunya heat, vomiting, loss of appetite, lymph nodes. General fever 1 to 7 days to fever, and some patients about 3 days after the emergence of a slight fever (bimodal heat), for 3 to 5 days to return to normal. Some patients may have conjunctival hyperemia and mild photophobia.
(2) rash 80% of patients in the onset of 2 to 5 days after the trunk, limbs stretch side, palms and foot rash, rash, pimples or purpura, rash skin mostly normal, some patients with itching sense. After a few days subsided, may be accompanied by a slight desquamation.
(3) joint pain fever at the same time, multiple joints and spine pain, joint swelling, may be associated with systemic myalgia. Arthralgia mostly migratory, with the increase in exercise, heavier morning The disease develops rapidly, often within minutes or hours of joint function loss, can not be active. Mainly involving small joints, such as hand, wrist, ankle and toe joints, etc., may also involve knee and shoulder and other large joints, wrist pressure caused by severe pain is the characteristics of this disease. Joint fluid is rare. X-ray examination is normal.
(4) other very few patients can appear meningoencephalitis, liver function damage, myocarditis and skin and mucous membrane bleeding.
Recovery period
Acute phase, the vast majority of patients with joint pain and stiffness can be fully restored. Some patients with persistent joint pain and stiffness up to several weeks to several months, or even more than 3 years. Individual patients left joint function damage and other sequelae.
an examination
General check
(1) blood tests normal white blood cell count, a small number of patients with the total number of white blood cells and lymphopenia, mild reduction of plaets.
(2) biochemical examination of some patients serum ALT, AST, creatine kinase (CK) increased.
(3) cerebrospinal fluid examination meningoencephalitis in patients with cerebrospinal fluid examination in line with changes in viral damage.
2. serological examination
(1) serum specific IgM antibody by ELISA, immunochromatography and other methods to detect the capture method to detect IgM antibody results are more reliable. Under normal circumstances, the first day after the onset of IgM antibodies, the first 5 days the majority of patients were positive.
(2) Serum specific IgG antibody was detected by ELISA, immunofluorescence assay (IFA), immunochromatography and other methods. Under normal circumstances, the first 2 days after the onset of IgG antibodies, the first 5 days the majority of patients were positive.
3. Etiological examination
(1) nucleic acid detection using RT-PCR and Real-time PCR and other nucleic acid amplification method. Virus nucleic acids can be detected in the serum of most patients within 4 days of onset.
(2) virus isolation collected 2 days after the onset of serum samples, with Vero, C6 / 36, BHK-21 and HeLa and other sensitive cells for virus isolation.