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人肺細胞HLF-a細胞株

時間:2014/3/6閱讀:1084
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人肺細胞HLF-a細胞株


1.酶標抗體的制備
2.取材 將培養(yǎng)細胞或懸浮細胞用0.1Mol/L PBS液沖洗,離心沉淀后,立即轉(zhuǎn)入固定液(2%甲醛液或2%戊二醛液均可)pH 7.2,4℃固定5min~30min(依抗原性質(zhì)所定)。如病料為組織塊,則取適當大小,先固定1h然后取出,以新的雙面刀片切成50~100μm的薄組織再行固定1h~2h。
3.漂洗 以PBS液漂洗夜,換液3~4次。
4.血清孵育,25℃1h或4℃夜,孵育的標本放置于加蓋的瓷盤內(nèi),底層墊數(shù)層紗布。防止抗血清干燥凝固,不易洗脫,造成非特異性吸附。
5.PBS沖洗3~4次,每次10min。
6.2.5%戊二醛再固定15min~30min。
7.PBS液沖洗3~4次每次10min。
8.酶標記抗體孵育;用適當稀釋的酶標抗體(即工作濃度)于25℃濕盆內(nèi)孵育1h或4℃夜。
9.PBS液沖洗3~4次每次10min或4℃漂洗夜。
10.酶顯色處理 將漂洗后的標本浸入DAB-H2O2底物溶液中,20℃,10min~30min。顯色強弱與戊二醛的固定有關。若顯色弱則可減少甚至取消戊二醛的固定時間。沖洗時必須注意防止非特異漂浮的沉積。
11.常規(guī)包埋、切片、電鏡觀察 在經(jīng)過脫水包埋確定抗原性不致引起失活的前提下可在包埋切片后做標記染色,切片一般在2μm~4μm,切片后染色不存在通透困難的問題。無論在標記染色后切片還是在切片后標記染色,在光鏡下定位選擇后,再做電鏡定位包埋,這樣目的性強,可減少工作量。


人肺細胞HLF-a細胞株


人肺癌細胞TKB-1  
人肺腺癌細胞LTEP-a-2  
人肺腺癌細胞Lu-165  
人大細胞肺癌細胞NCI-H460  
人肺腺癌細胞SPC-A-1  
人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞095-D  
人肺鱗癌細胞SK-MES-1  
人大細胞肺癌細胞NCI-H661  
人肺黏液上皮樣癌細胞NCI-H292  
人肺退行性癌細胞Calu-6  
人肺腺癌細胞NCI-H1395  
人非小細胞肺癌細胞NCI-H358  
人非小細胞肺癌細胞HCC827  
人典型小細胞肺癌細胞NCI-H1688  
人非小細胞肺癌細胞NCI-H1299  
人胚肺二倍體細胞2BS  
人支氣管上皮樣細胞BEAS-2B  
人胚肺成纖維細胞CCC-HPF-1  
人胚胎氣管組織來源細胞CCC-HBE-2  
人肺腺癌細胞Calu-3  
人肺退行性癌細胞Calu-6  
人小細胞肺癌細胞DMS 153  
人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞95-D  
人低分化肺腺癌細胞GLC-82  
人肺細胞HLF-a  
人胚肺二倍體細胞HEL-1  
人胚肺二倍體細胞HEL-2  
人肺癌細胞H1299  
人非小細胞肺癌細胞HCC827  
人胚肺二倍體細胞KMB-17  
人胚肺細胞系KuMA  
人肺鱗癌細胞LTEP-s  
人小細胞肺癌細胞LTEP-sm  
人肺鱗癌瘤株LTEP-s  
人肺腺癌細胞LTEP-a-2 

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