小鼠胚胎細(xì)胞SC-1細(xì)胞染色
在惡性腫瘤的胸腹水中有大量的分裂期細(xì)胞，其中多以非整倍體細(xì)胞存在，并含有各種標(biāo)記染色體。
1、 實(shí)驗(yàn)材料
2.5%碘精、75%酒精、無菌棉球、鑷子20-22號無菌腰穿包、50ml離心管、秋水仙素、KCL、甲醇、冰乙酸、載玻片等。
2、 操作過程
（1）采樣：選擇有胸或腹水患者，在無菌條件下，輕腹穿刺或于手術(shù)取胸或腹水20-50ml；
（2）培養(yǎng)：立即加入秋水仙素培養(yǎng)，zui終濃度為0.02-0.04ug/ml胸腹水，置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)4-6小時(shí)；
（3）低滲及后期制作羊水細(xì)胞。
小鼠胚胎細(xì)胞SC-1細(xì)胞染色 細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)原理：
兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)胞合并成一個(gè)雙核或多核細(xì)胞的現(xiàn)象稱為細(xì)胞融合，也稱細(xì)胞雜交，在自然情況下的受精過程即屬這種現(xiàn)象。
誘導(dǎo)細(xì)胞融合的主要方法有：病毒誘導(dǎo)融合，化學(xué)融合劑誘導(dǎo)融合和電融合。
1. 病毒誘導(dǎo)融合：有許多種類的病毒能介導(dǎo)細(xì)胞融合，zui常用的是滅活的仙臺病毒（HVJ），為RNA病毒。病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的過程有：首先是細(xì)胞表面吸附許多病毒粒子，接著細(xì)胞發(fā)生凝集，幾分鐘至幾十分鐘后，病毒粒子從細(xì)胞表面消失，而就在這個(gè)部位鄰接的細(xì)胞的細(xì)胞膜融合，胞漿相互交流，zui后形成融合細(xì)胞。
2. 化學(xué)融合劑誘導(dǎo)融合：化學(xué)融合劑主要有脂肪酸衍生物、脂質(zhì)體、鈣離子、水溶性高分子化合物、水溶性蛋白質(zhì)和多肽，其中zui常用的是聚已二醇（PEG）。PEG用于細(xì)胞融合至少有兩方面的作用：①可促使細(xì)胞凝結(jié)；②破壞互相接觸處的細(xì)胞膜的磷脂雙分子層，從而使相互接觸的細(xì)胞膜之間發(fā)生融合，進(jìn)而細(xì)胞質(zhì)溝通，形成一個(gè)打的雙核或多核融合細(xì)胞。
3. 電融合：是指細(xì)胞在電場中極化成偶極子，并沿著電力線排列成串，然后用高強(qiáng)度、短時(shí)程的電脈沖擊穿細(xì)胞膜而導(dǎo)致細(xì)胞融合。
細(xì)胞融合技術(shù)在基因定位、基因表達(dá)產(chǎn)物、腫瘤診斷核治療、生物新品種培育及單克隆抗體技術(shù)等領(lǐng)域有著非常廣泛的應(yīng)用前景。單克隆抗體技術(shù)就是通過細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展起來的，在生命科學(xué)研究核應(yīng)用方面產(chǎn)生了重大影響。
小鼠胚胎細(xì)胞SC-1細(xì)胞染色 實(shí) 驗(yàn) 操 作
小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞MC3T3-E1
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞PA12
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEF
小鼠原 B細(xì)胞株BaF3
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞C3H 10T1/2 2A6
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞BALB/C 3T3
小鼠子宮頸癌細(xì)胞U14
小鼠子宮頸癌細(xì)胞U14-GFP
正常小鼠睪丸 Sertoli細(xì)胞TM4
小鼠胚胎細(xì)胞SC-1
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(小鼠前體脂肪細(xì)胞)3T3-L1
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞Psi2 DAP
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞BALB/3T3clone A31
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞C3H/10T1/2, Clone 8
小鼠畸胎瘤細(xì)胞F9
小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞MLTC-1
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞NIH/3T3
小鼠畸胎瘤細(xì)胞P19
小鼠淋巴瘤細(xì)胞(NK靶細(xì)胞)YAC-1
小鼠單核巨噬細(xì)胞J774A.1
小鼠T淋巴瘤細(xì)胞Cyc-Tag(S49)
小鼠血細(xì)胞WEHI-3
小鼠B淋巴細(xì)胞WEHI 231
小鼠淋巴細(xì)胞白血病L1210
小鼠T淋巴細(xì)胞Cl.Ly1+2-/9
小鼠淋巴瘤細(xì)胞P388D1(IL-1)
小鼠漿細(xì)胞瘤MPC-11
小鼠睪丸支持細(xì)胞（PyTL基因修飾）15P-1
小鼠T淋巴瘤細(xì)胞E.G7-OVA
小鼠巨噬細(xì)胞Ana-1
小鼠淋巴瘤細(xì)胞EL4
小鼠淋巴瘤細(xì)胞EL4.IL-2
小鼠白血病細(xì)胞L1210
小鼠淋巴瘤細(xì)胞L5178Y TK+/-clone(3.7.2C)
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞RAW 264.7
小鼠淋巴瘤細(xì)胞P388D1
1.在公雞翼下靜脈抽取2ml雞血，加入盛有8ml的Alsever液中，使血液與Alsever液的的比例達(dá)1∶4，混勻后可在冰箱中存放一周；
2.取此儲存雞血0.2ml加入0.8ml的0.85％生理鹽水，充分混勻，1500r/min離心5min，棄去上清，加入1ml的0.85％生理鹽水，重復(fù)上述條件離心兩次。zui后棄去上清，加GKN液0.8ml，離心；
3.棄去上清，加入0.3ml的GKN溶液，制成細(xì)胞懸液；（也可以用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，用GKN液將其調(diào)整為106個(gè)/ml）；
4.取以上細(xì)胞懸液0.2ml放入1ml的EP管中，然后放入37℃水浴中預(yù)熱，同時(shí)將50％PEG液一并預(yù)熱20min；
5.20min后將0.2ml的50％PEG溶液逐滴沿離心管壁加入到0.2ml細(xì)胞懸液中，邊加邊搖勻，然后放入37℃水浴中保溫20min；
6.20min后，加入GKN溶液1ml，靜止于水浴中20min左右；
7.1500r/min離心5min，棄去上清，加GKN溶液再離心1次；
8.棄去上清，加入GKN液少許，混勻，取少量懸浮于載玻片上，加入詹納斯綠染液，用牙簽混勻，3min蓋上蓋玻片，觀察細(xì)胞融合情況。
相關(guān)實(shí)驗(yàn)溶液的配制
Alsever溶液：葡萄糖2.05g，檸檬酸鈉0.80g，NaCl 0.42g，溶于100ml雙蒸水中。
GKN溶液：NaCl 8g，KCl 0.4g，Na2HPO4·2H2O 1.77g，NaH2PO4·H2O 0.69g，葡萄糖2g，酚紅0.01g，溶于1000ml水中。
50％PEG溶液：稱取一定量的PEG（WM＝4000）放入燒杯中，沸水浴加熱，使之熔化，待冷卻至50℃時(shí)，加入等體積預(yù)熱至50℃的GKN溶液，混勻，置37備用。
