細胞：HSC3細胞

中文名稱：人舌鱗癌細胞

生長特性：貼壁細胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請嚴格遵照無菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ粢萠酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。

3． 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。

（網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）

胚胎干細胞信號途徑研究新發(fā)現(xiàn)

研究發(fā)現(xiàn)Wnt和TGF-β信號途徑是離體條件下使用胚胎干細胞來誘導形成原條（primitive streak，亦稱原線，是鳥類和哺乳類發(fā)育初期的胚盤上先于器官原基在明區(qū)內(nèi)暫時出現(xiàn)的，沿中線走行的線條狀隆起）所必須的。 

發(fā)育動物中，原條的形成和它衍生的胚層（中胚層和內(nèi)胚層）是許多組織形成的先決條件。 

K562細胞 白血病細胞種屬：人、LNCaP細胞 前列腺癌細胞種屬：人

為了在離體條件下模擬這些發(fā)育階段，研究使用了一種胚胎干細胞。除了表達來源于brachyuri基因座的GFP蛋白，這種細胞還表達來自foxa2基因座的CD4。，一種表達不同水平的CD4-Foxa2的GFP-Bry+細胞群體因這種胚胎干細胞系的分化而形成。 

對基因表達模式和發(fā)育潛力的分析表明CD4-Foxa2hiGFP-Bry+細胞群表現(xiàn)出了早期原條的特征，而CD4-Foxa2loGFP-Bry+細胞則像晚期原條。 

MOLT-4細胞 白血病細胞種屬：人、MRC-5細胞 成纖維細胞種屬：人

利用這種模型，研究證實Wnt和TGF-β/nodal/activin信號途徑都是產(chǎn)生CD4-Foxa2+gfp-Bry+細胞所必須的。Wnt或低水平的acitvin能誘導出一種后期的原條細胞群，而高水平的actinvin則誘導形成一種早期的原條細胞。

MEL細胞  白血病細胞種屬:小鼠、MCF 7B細胞 腺癌細胞種屬：人

最終，研究發(fā)現(xiàn)持續(xù)的activin信號能夠刺激CD4-Foxa2+GFP-Bry+胚胎干細胞群形成內(nèi)胚層。這些發(fā)現(xiàn)表明，與胚胎中胚層誘導有關的發(fā)育事件能夠在胚胎干細胞模型中重現(xiàn)，并因此了解到與內(nèi)胚層和中胚層形成有關的信號途徑。