細(xì)胞：SK-HEP-1細(xì)胞

中文名稱：人肝腹水腺癌細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢萠酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）

小鼠卵巢內(nèi)存在雌性干細(xì)胞

經(jīng)典理論認(rèn)為哺乳動(dòng)物出生時(shí)卵巢已形成了終生所需的原始卵泡，出生后沒(méi)有卵細(xì)胞的再生。然而，近來(lái)一些研究對(duì)經(jīng)典理論提出了質(zhì)疑，認(rèn)為卵 中可能存在干細(xì)胞及卵的再生。

但這些證據(jù)主要來(lái)自體外實(shí)驗(yàn)（細(xì)胞培養(yǎng)及移植），無(wú)法說(shuō)明生條件下體內(nèi)存在巢干細(xì)胞并發(fā)揮重要功能。

澄清體內(nèi)是否存在巢生 干細(xì)胞以及它們對(duì)巢功能維持的意義，將會(huì)革新人們對(duì)卵細(xì)胞發(fā)生過(guò)程的認(rèn)識(shí)。研究團(tuán)隊(duì)對(duì)這一爭(zhēng)議巨大的科學(xué)問(wèn)題進(jìn)行了探討。

他們首先確定了成年小鼠（兩月齡）巢皮層中存在尚未形成卵泡的生細(xì)胞，其中有些細(xì)胞處于較原始未分化狀態(tài)（表達(dá)Oct4但不表達(dá)分化基因Dazl或Ddx4）。

隨后利用可控示蹤體系對(duì)表達(dá)Oct4的較原始的生細(xì)胞進(jìn)行了長(zhǎng)達(dá)4個(gè)月的體內(nèi)標(biāo)記示蹤，持續(xù)觀察到一些YFP標(biāo)記的細(xì)胞進(jìn)入減數(shù)分裂并形成原始卵泡以及極少數(shù)YFP標(biāo)記的細(xì)胞進(jìn)行DNA復(fù)制和有絲分裂。