細胞：H1299細胞
中文名稱：人肺癌細胞
生長特性：貼壁細胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請嚴格遵照無菌操作）
1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通常控制在 1-2min）
2． 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ粢萠酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3． 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當的培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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揭示干細胞分化為胰島β-細胞的調控機制
研究人員分析了胰腺干細胞向β-細胞分化過程中的微小核糖核酸變化規(guī)律，發(fā)現調節(jié)胰腺干細胞向β-細胞分化中的關鍵通路，從轉錄水平上揭示了胰島素(insulin)分泌細胞的調控機制。
干細胞是機體發(fā)育過程中保留在機體各組織器官、一類具有自我復制能力的多潛能細胞，是組織工程和基因工程重要的種子細胞。
干細胞移植現已成為治療糖尿病的一種臨床新技術，利用具有較強增殖能力的胰腺干細胞離體大量增殖和分化為分泌胰島素的β-細胞是解決胰島移植過程中供體來源缺乏和免疫排斥問題的可行途徑之一。
此次通過構建雞胰腺干細胞系，并研究調控胰腺干細胞分化的microRNA，通過對特異microRNA的靶基因預測，從54個靶基因中驗證3個靶基因作為microRNA-21調控對象參與胰腺干細胞向β-細胞定向分化并促進胰島素分泌。
該研究成果不僅揭示了microRNA-21在胰腺發(fā)育中的作用，也為今后胰腺干細胞的研究提供理論依據。
