細(xì)胞:C26細(xì)胞
中文名稱:小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢萠酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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一個簡單的88基因刻度表來測量干細(xì)胞的有用性。這個刻度表或許可以幫助查明他們是否能將成體干細(xì)胞--例如血液和皮膚的干細(xì)胞--轉(zhuǎn)化為由修復(fù)組織的意料價值的干細(xì)胞。
這88個基因是小鼠早期胚胎或干細(xì)胞培養(yǎng)物中頻繁被激活的近3000個基因中的一個亞組;
研究發(fā)現(xiàn)這個亞組基因活性的變化與干細(xì)胞分化成其它細(xì)胞類型的能力有關(guān)聯(lián)。直到現(xiàn)在,檢驗干細(xì)胞分化潛力的途徑就是對其進行培養(yǎng),然后檢查其后代。
例如,一個剛剛受精、能夠產(chǎn)生機體內(nèi)任何一種細(xì)胞類型的卵子在分析中得一分;能分化為血液或神經(jīng)細(xì)胞的成熟一點的細(xì)胞也得一分。
我們將測定這88個基因的活性來確定干細(xì)胞處于什么階段,這個刻度表可以揭示實驗室培養(yǎng)的干細(xì)胞是否真的與特殊胚胎組織中的干細(xì)胞功效一樣。
許多研究人員都在竭力了解在胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞和心臟或大腦細(xì)胞中,分別有什么樣的基因組合被打開。了解這些,可以揭示出將一種細(xì)胞類型轉(zhuǎn)化為另一類型的方法,從而用于心臟病、帕金森氏癥等多種疾病的治療。
這88個基因并不一定就是驅(qū)動這種細(xì)胞轉(zhuǎn)化的基因。他們可能只是在這個轉(zhuǎn)變中改變。
通過類似的方法,研究小組找到10個似乎刻畫人類胚胎干細(xì)胞特征的基因。希望用這些基因,為臨床試驗提供源源不斷的胚胎干細(xì)胞供應(yīng)。