細(xì)胞：B16細(xì)胞

中文名稱(chēng)： 小鼠黑色素瘤細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢萠酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）

乳癌中的APOBEC3B表達(dá)與細(xì)胞增殖密切相關(guān)。發(fā)現(xiàn)一種缺失多樣性與免疫激活有關(guān)。研究揭示了“T細(xì)胞受體"是識(shí)別人體內(nèi)正常細(xì)胞和病毒的關(guān)鍵。

乳癌和其他癌癥的基因組測(cè)序研究，已經(jīng)確定了APOBEC3B (A3B，AID/APOBEC胞苷脫氨酶家族成員)內(nèi)源性增變基因活性所引起的突變模式。

A3B是一種細(xì)胞脫氨酶，在許多腫瘤中是超表達(dá)的，被認(rèn)為是癌癥相關(guān)突變的一個(gè)重要原因，但是，引起A3B上調(diào)的因素仍不明確。此外，還存在一種共同的生殖細(xì)胞缺失多樣性(A3Bdel)，因此，很大一部分的人群并不表達(dá)A3B蛋白。

為了檢測(cè)A3B在乳腺癌中的表達(dá)及其結(jié)構(gòu)性缺失的原因和后果，分析了兩大臨床注釋的乳腺癌數(shù)據(jù)集——The Cancer Genome Atlas (TCGA) and the molecular Taxonomy of Breast Cancer International Consortium (METABRIC)，試圖解決這些觀察結(jié)果所提出的生物學(xué)和臨床問(wèn)題，主要目的是解決基因表達(dá)和多態(tài)性關(guān)聯(lián)之間的不一致性。

研究確認(rèn)，A3B表達(dá)與侵襲性臨床病理特征及預(yù)后不良有關(guān)，并表明在乳腺癌和16種其他實(shí)體瘤的15種腫瘤中，A3B表達(dá)與增殖特征高度相關(guān)(有絲分裂和細(xì)胞周期相關(guān)基因的表達(dá))。

A3B缺失的純合子a3bdel所引起的乳腺癌患者的這些特征并沒(méi)有不同，從而表明A3B表達(dá)是增殖增加的一種反映而不是直接原因。利用基因集合富集分析(GSEA)，在a3bdel乳腺癌中檢測(cè)到了一種免疫激活模式，似乎與a3bdel攜帶者中出現(xiàn)的突變相關(guān)。

這些結(jié)果為A3B超表達(dá)及其預(yù)后影響提供了一個(gè)解釋?zhuān)С謱⑦@個(gè)增變基因作為一個(gè)癌癥生物標(biāo)志物或藥物靶點(diǎn)。盡管a3bdel的免疫特征還需要更多的研究，但這些研究結(jié)果仍然推薦將a3bdel多態(tài)性作為腫瘤免疫治療的一個(gè)潛在預(yù)測(cè)因子。