細(xì)胞：RH-35細(xì)胞

中文名稱(chēng)：大鼠肝癌細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢萠酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。

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干細(xì)胞是一類(lèi)具有自我更新、高度增殖和多向分化潛能的細(xì)胞群體。根據(jù)個(gè)體發(fā)育過(guò)程中出現(xiàn)的先后次序，干細(xì)胞可分為胚胎干細(xì)胞（ESC）和成體干細(xì)胞（ASC）。

ESC具有發(fā)育的全能性，在一定條件下可以向內(nèi)、中、外三個(gè)胚層的細(xì)胞和組織分化，已可成功分離并建系，由于不同個(gè)體間的免疫屏障和倫理學(xué)問(wèn)題存在廣泛爭(zhēng)議，其應(yīng)用仍停留在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)階段。

成體組織的ASC由于自身遺傳背景，避免了倫理問(wèn)題和免疫屏障，同時(shí)來(lái)源豐富、容易獲得、體外誘導(dǎo)條件相對(duì)成熟，在血液病、心腦血管疾病、惡性腫瘤等疾病的治療和組織損傷修復(fù)方面有廣闊的應(yīng)用前景，已成為生命科學(xué)研究的一個(gè)新熱點(diǎn)，本次會(huì)議有多個(gè)具有水平的專(zhuān)題報(bào)告介紹了這方面的研究成果。

在干細(xì)胞生物學(xué)研究中，人們發(fā)現(xiàn)某些成體組織細(xì)胞不但能再生，而且在一定條件下可跨系統(tǒng)、跨胚層分化成其他組織細(xì)胞，稱(chēng)為ASC的可塑性，其機(jī)制尚未闡明，且存在廣泛爭(zhēng)議。

MAPC體外培養(yǎng)可分化形成大多數(shù)的臟壁中胚層、神經(jīng)外胚層和內(nèi)胚層細(xì)胞；移植給非照射的宿主，MAPC可植活并向造血系統(tǒng)、肝臟、肺和腸分化。MAPC體外擴(kuò)增能力強(qiáng)，培養(yǎng)擴(kuò)增80代后仍可維持其細(xì)胞表型和多向分化潛能。