苯基-瓊脂糖凝膠 6FF使用方法由上海遠(yuǎn)慕生物提供介紹，本司現(xiàn)貨出售ELISA試劑盒，動物血清，標(biāo)準(zhǔn)品對照品，培養(yǎng)基，抗體，抗原，生化試劑，化學(xué)試劑，生物試劑，多肽，酶類，染色液，溶液，緩沖液，實(shí)驗(yàn)耗材，其他試劑等，全程提供實(shí)驗(yàn)操作指導(dǎo)，咨詢！

苯基-瓊脂糖凝膠 6FF參數(shù)說明

中文名：苯基-瓊脂糖凝膠 6FF

英文名：Phenyl -Sepharose 6FF

供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格：25ml、100ml、500ml

性 狀：白色微球

凝膠類型：疏水層析介質(zhì)

粒徑：45-165µm

工作PH值：3-13

應(yīng)用：疏水層析介質(zhì)，快流速，適合生物大分子和疫苗的分離純化等。

苯基-瓊脂糖凝膠 6FF

苯基-瓊脂糖凝膠 6FF使用方法

1.裝柱：

a、讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫；配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。

b、根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始緩沖液(按凝膠：緩沖液=3：1的比例)配成勻漿。

c、將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜)，務(wù)必使底端無氣泡。

d、用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡；打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。

e、打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過，使柱床穩(wěn)定；用2~3柱體積的緩沖液平衡柱子。

2.平衡：

讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變；平衡緩沖液一般是高鹽濃度的緩沖液，如0.02~0.05mol/L的PBS加1~2.5mol/L(NH4)2SO4等。

3.上樣：

a、樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。

b、一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上，用平衡液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。

c、介質(zhì)對樣品組分吸附的程度取決于樣品的疏水性質(zhì)、流動相的離子強(qiáng)度和溫度；鹽濃度大、溫度高或樣品組分疏水性強(qiáng)，介質(zhì)對組分吸附牢。

4.洗脫：

疏水介質(zhì)可用減小鹽濃度進(jìn)行洗脫；加表面活性劑或有機(jī)溶劑可加強(qiáng)洗脫；zui常用的洗脫液是低鹽濃度緩沖液，如0.02~0.05mol/L的PBS。

5.再生：

一般用低鹽濃度的緩沖液洗，洗10倍以上柱體積，接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用；若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時洗不掉，可用在位清洗(CIP)除去。

6.在位清洗：

a、對于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可以用2MNacl去除。

b、對沉淀蛋白、對以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類，可用1MNaOH去除。

c、對強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等，用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡；清洗完畢后，用至少3倍緩沖液平衡柱子。

7.去熱源：

用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時或用0.1M的氫氧化鈉24小時；或用以下方法步驟去除：

a、2倍柱體積的70%乙醇；

b、2倍柱體積50mMTris-HclpH7.5；

c、1倍柱體積4M尿素；

d、3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1MNaCl；上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。

8.消毒：

用0.5~1MNaOH室溫下洗8~10倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。

苯基-瓊脂糖凝膠 6FF使用注意事項(xiàng)

1、上樣之前，樣品必須去除色素，否則色素會被吸附到填料上，影響填料的正常使用。

2、運(yùn)輸中應(yīng)避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。

3、在裝柱、使用和保存柱子的時候，要避免柱子流干，氣泡進(jìn)入。

苯基-瓊脂糖凝膠 6FF化學(xué)性質(zhì)

保存：產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~30℃(保存溶液為20%乙醇+0.1M醋酸鈉)，通風(fēng)、干燥、清潔的地方；不能冷凍；用過的柱子貯存在4℃(20%乙醇)；保質(zhì)期5年。

苯基-瓊脂糖凝膠6FF是將苯基鍵合在6FF瓊脂糖微球上形成的一種可利用疏水相互作用來實(shí)現(xiàn)目標(biāo)產(chǎn)品純化分離的疏水類介質(zhì)；用于生物大分子和乙肝疫苗的純化分離；本品為白色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質(zhì)。

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