大鼠瘦素（LEP）Elisa試劑盒操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
8μg/L 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
4μg/L 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2μg/L 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1μg/L 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0.5μg/L 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同） 、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測樣品孔。 在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl， 待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色） 。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值） 。 測定應(yīng)在加終止
液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行
大鼠瘦素（LEP）Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠瘦素 （LEP） 水平。 用純化的大鼠瘦素 （LEP）
抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入瘦素（LEP） ，再與HRP 標(biāo)
記的瘦素（LEP）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB
顯色。TMB在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深
淺和樣品中的瘦素（LEP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通
過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠瘦素（LEP）濃度
大鼠瘦素（LEP）Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：
人Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)試劑盒說明書，96T/48T
人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)試劑盒說明書，96T/48T
人抗眼肌抗體(EMAb)試劑盒說明書，96T/48T
人熱休克蛋白27(HSP-27)試劑盒說明書，96T/48T
人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)試劑盒說明書，96T/48T
人膜輔蛋白(MCP/CD46)試劑盒說明書，96T/48T
人游離蛋白S(FP-S)試劑盒說明書，96T/48T
人26S蛋白酶體(26S PSM)試劑盒說明書，96T/48T
人延伸蛋白(elongin)試劑盒說明書，96T/48T
人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)試劑盒說明書，96T/48T
人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)試劑盒說明書，96T/48T
人?；碳さ鞍?ASP)試劑盒說明書，96T/48T
人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)試劑盒說明書，96T/48T
人細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(MEPE)試劑盒說明書，96T/48T
人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)試劑盒說明書，96T/48T
人胃泌素釋放多肽(GRP)試劑盒說明書，96T/48T
人復(fù)制蛋白A(RPA-70)試劑盒說明書，96T/48T
人未磷酸化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1試劑盒說明書，96T/48T
人嗜鉻蛋白A(CgA)試劑盒說明書，96T/48T
人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)試劑盒說明書，96T/48T
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