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人白細(xì)胞介素-8(IL-8)Elisa試劑盒

閱讀:104發(fā)布時間:2014-11-28

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    華瑞科研網(wǎng)-ELISA試劑盒

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人白細(xì)胞介素-8(IL-8)Elisa試劑盒操作步驟 
1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。 
1200ng/L  5 號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
600 ng/L  4 號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
300 ng/L  3 號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
150 ng/L  2 號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
75 ng/L  1 號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
 
 
2.  加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同) 、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。 在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl, 待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,
然后再加待測樣品10µl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 
3.  溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。     
4.  配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用 
5.  洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復(fù) 5次,拍干。 
6.  加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,空白孔除外。   
7.  溫育:操作同3。 
8.  洗滌:操作同5。 
9.  顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘. 
10.  終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色) 。 
11.  測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值) 。 測定應(yīng)在加終止
液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人白細(xì)胞介素-8(IL-8)Elisa試劑盒保存條件及有效期 
1.試劑盒保存: ;2-8℃。 
2.有效期:6個月 


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