人B型腦鈉肽（BNP）Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人B型腦鈉肽（BNP）水平。用純化的人B型腦鈉肽（BNP）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入B型腦鈉肽（BNP），再與HRP標(biāo)記的B型腦鈉肽（BNP）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的B型腦鈉肽（BNP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人B型腦鈉肽（BNP）濃度。
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人B型腦鈉肽（BNP）Elisa試劑盒操作步驟
- 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
80μg/L | 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
40μg/L | 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
20μg/L | 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
10μg/L | 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
5μg/L | 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
- 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
- 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
- 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
- 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
- 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
- 溫育：操作同3。
- 洗滌：操作同5。
- 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
- 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
- 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人B型腦鈉肽（BNP）Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：
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小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)試劑盒說明書，96T/48T供應(yīng)
小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)試劑盒說明書，96T/48T供應(yīng)
小鼠白介素27(IL-27)試劑盒說明書，96T/48T供應(yīng)
小鼠白介素23(IL-23)試劑盒說明書，96T/48T供應(yīng)
小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)試劑盒說明書，96T/48T供應(yīng)
小鼠p53(p53)試劑盒說明書，96T/48T供應(yīng)
小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)試劑盒說明書，96T/48T供應(yīng)
小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)試劑盒說明書，96T/48T供應(yīng)
小鼠血小板活化因子(PAF)試劑盒說明書，96T/48T供應(yīng)
小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 試劑盒說明書，96T/48T供應(yīng)
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小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒說明書，96T/48T供應(yīng)
小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)試劑盒說明書，96T/48T供應(yīng)
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