您好, 歡迎來到智慧城市網(wǎng)! 登錄| 免費注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
一、材料
1. Resazurin細胞活力檢測試劑盒(Biotium,Inc.30025)
2. 細胞:在本試驗中,使用了三種人類前列腺癌細胞系進行檢測。
(1)DU145(ATCC,HTB-81)
(2)PC3(ATCC,CRL-1435)
(3)LNCap(ATCC,CRL-1740)
二、儀器
1. SpectraPLUS酶標儀
三、步驟
1. 標準曲線制備:
(1)在96孔板中加入100 μL 培養(yǎng)基,然后接種適量細胞,貼壁細胞控制在40~10 000/孔,懸浮細胞控制在2 000~500 000/孔。用100 μL 不加入細胞的培養(yǎng)基作為空白對照。
(2)在培養(yǎng)基中加入10 μL resazurin溶液,37℃過夜培養(yǎng)細胞(1~24小時)。
(3)使用微量酶標儀分別檢測570 nm 和600 nm 下的吸光值。
(4)獲得每一個樣品的在OD570和OD600下的吸光值,制作標準曲線來確定試驗中的zui適細胞濃度。
2. 細胞活力分析:
(1)選擇zui適的細胞濃度,使用96孔板進行細胞培養(yǎng)。對于人類前列腺癌細胞DU145,PC3andLNcap,經(jīng)常使用的濃度是2 000-5 000/孔。
(2)根據(jù)你設(shè)計的試驗,在對應(yīng)的孔中加入相應(yīng)試劑對細胞進行處理一段時間。
(3)在培養(yǎng)基中加入10 μL resazurin溶液,37℃過夜培養(yǎng)細胞(1-24小時)。
(4)使用微量酶標儀分別檢測570 nm 和600 nm 下的吸光值。
(5)獲得每一個樣品的在OD570和OD600下的吸光值,區(qū)分處理的樣品和對照樣品的吸光值,將對照樣品的吸光值設(shè)置為100%來計算處理后細胞的活力。
(6)細胞活力=(檢測樣品的OD值)/(對照樣品的OD值)x100%
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責,智慧城市網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。