一、原理：微生物細(xì)胞在超聲波的作用下，細(xì)胞結(jié)構(gòu)受到破壞，而使細(xì)胞破碎。

二、材料與試劑：超聲波破碎儀、顯微鏡、燒杯、細(xì)胞破碎緩沖液(10mmol/L，PH7.4Tris-HCL緩沖液中含5mmol/L的MgCL2)、細(xì)胞懸浮液(取50-100mg)大腸桿菌濕細(xì)胞懸浮在1ml細(xì)胞破碎緩沖液中)、培養(yǎng)基(0.5%、蛋白胨1%，NaCL0.5%制成肉湯液體培養(yǎng)基。取上述肉湯培養(yǎng)基加進(jìn)2%瓊脂，制成固體培養(yǎng)基，用作菌種活化與保藏)。

三、操作方法

1、細(xì)胞培養(yǎng)和收集：將活化菌種接入肉湯培養(yǎng)基中，于37℃振蕩培養(yǎng)。當(dāng)?shù)竭_(dá)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后(約6h)，用離心機(jī)收集細(xì)胞，8000r/min離心5min，或3000r/min離心20min。

2、在顯微鏡下觀察細(xì)菌的形態(tài)特征。

3、細(xì)胞破碎：取濕細(xì)胞50-100mg懸浮于1ml細(xì)胞破碎緩沖液中。用20kHz頻率，150W的功率，在冰浴中進(jìn)行超聲波破碎，每破碎60s，間隔60s，反復(fù)破碎三次。

4、在顯微鏡下觀察破碎后的細(xì)胞形態(tài)。