采用離子交換柱純化蛋白時(shí)，洗脫采用的離子強(qiáng)度的大小范圍應(yīng)該如何確定，可以根據(jù)什么來(lái)調(diào)整洗脫時(shí)的離子強(qiáng)度？

離子交換純化是利用離子交換劑上的可解離基團(tuán)（活性基團(tuán)）對(duì)各種離子的親和力不一樣人達(dá)到分離的目的的一種分離技術(shù)。離子交換劑是含有若干活性基團(tuán)的不溶性物質(zhì)，即在不溶性母體上引入若干可解離基團(tuán)而成，根據(jù)引入解離基團(tuán)的不同，可以分為陽(yáng)離子交換劑和陰離子交換劑。各種離子對(duì)離子交換劑的親和力各不相同，親和力隨離子的價(jià)數(shù)與原子序數(shù)增加而增加，而隨離子水化膜半徑的增加而降低。對(duì)具體離子交換純化，需要主要離子交換劑的選擇和處理。洗脫不同蛋白的zui恰當(dāng)?shù)碾x子強(qiáng)度液不一定一樣，通常采用濃度梯度和PH梯度相結(jié)合的方式洗脫，純化不同的蛋白先摸一摸洗脫液的離子濃度和PH值，其具體的離子濃度范圍可以很大，0.01mol/l到1mol/l，甚至3.0mol/l，PH值的范圍液很廣。

因?yàn)榈鞍资峭ㄟ^(guò)靜電引力可逆的結(jié)合在離子交換樹(shù)脂上，要使蛋白與離子交換樹(shù)脂之間離子鍵打開(kāi)，zui常用的方法就是加大反荷離子的濃度。不同反荷離子與樹(shù)脂親和力是不同的，其強(qiáng)弱關(guān)系為： 陽(yáng)性競(jìng)爭(zhēng)離子：Ag⁺》CS⁺>K⁺>NH₄ ⁺>Na⁺>H⁺>Li⁺ 陰性競(jìng)爭(zhēng)離子：I->NO₃->(PO₄)₃->CN->HSO₃->Mg²⁺>HCO₃->HCOO->CH₃COO->OH->F- 如果某種離子溶液洗脫效果不好，可用另一種親和力強(qiáng)的離子代替。

離子交換柱屬于弱離子交換劑，只有在一定的pH值范圍內(nèi)，才能有離子交換能力。